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| 标识符 | CSTR:16397.09.0C11000049 |
|---|---|
| 资源中文名称 | A/California/07/2009(H1N1)经气管途径感染猪模型 |
| 资源英文名称 | A/California/07/2009 (H1N1) virus intratracheally infected pig model |
| 疾病概述 | 流感是由流感病毒引起的一种急性呼吸道传染病，它通过飞沫传播，能在短时间内迅速蔓延。2009年起源于北美的甲型H1N1流感曾经造成世界范围内的大流行，WHO曾将其警戒级别提升至最高级别6级，给人类社会和经济造成极大的负面影响。一项由WHO组织开展的研究显示，在2009至2010年的流感季中，全世界共有20%至27%的人被甲型H1N1病毒感染。尽管2010年8月WHO宣布全球已进入“流感大流行后期”，意味着“正常监测显示大多数国家的流感活动水平已恢复到季节性流感水平”，但同时指出，“局部地区仍有暴发甲型H1N1流感疫情的可能。” 本次疫情患者感染的是一种H1N1亚型流感病毒新毒株，它包含人流感病毒、北美禽流感病毒和北美、欧洲、亚洲三类H1N1流感病毒的基因片段。这种病毒已被证实经由人际传播，人感染后会出现高烧、精神不振、厌食、咳嗽等症状。科学家指出，打喷嚏、咳嗽和物理接触都有可能导致甲型H1N1流感病毒在人群间传播。这次甲型H1N1流感病毒呈现的另一大特点是对青壮年攻击性强，目前确诊甲型H1N1流感死者中大多数年龄都在25 ~ 45岁之间。 |
| 实验动物背景信息 |
猪既能感染人流感病毒，又能被禽流感感染，是因为猪上皮细胞表面同时存在着人和禽流感病毒的受体，而所有亚型流感病毒HA都识别唾液乳糖丝氨酸酶。禽流感倾向于结合SAα2,3半乳糖相联的结构，而人流感病毒倾向于与SAα2,6半乳糖相联的结构结合。SA分布于所有的流感病毒宿主体内，猪的气管中同时存在着SAα2,3半乳糖和SAα2,6半乳糖受体。猪通常被认为是流感病毒的混合器，自然界流行的流感病毒经过猪感染或传代后，出现病毒重组产生新的病毒。 制作流感病毒感染动物模型应用SPF小型猪，4月龄。 |
| 模型制作方法 |
病毒株为A/California/07/2009(H1N1)，实验猪经过麻醉后待肌肉彻底放松，将其放置仰卧位，用喉镜撑开会厌，通过气管插管途径感染病毒，感染剂量为107TCID50。感染后观察临床症状，监测存活率及体重变化率。感染后5d处死，收集肺组织，进行肺组织载量检测和病理学检查。 |
| 模型表型数据 |
1.猪模型感染后临床症状变化
感染病毒后，实验猪感染后未见明显临床症状，无死亡，存活率如图1所示。 图1 感染后猪存活率（n=3） 2.猪模型感染后病毒在肺组织中复制情况
实验猪在感染后第5d处死取肺组织，通过RT-PCR，可以检测到肺组织有病毒RNA复制，如图2所示。 图2 感染后猪肺组织载量（n=2） 3.猪模型感染后组织病理损伤
实验猪在感染后第5d处死取肺组织，免疫组织化学（IHC）检测发现病毒抗原分布在猪肺组织上。HE染色结果证实感染后猪肺组织即呈现出典型的流感病毒感染的病理表现，包括炎性充血和渗出性病理改变等等，并逐渐发展为间质性肺炎，如图2所示。 图2 感染后猪肺组织切片HE染色和免疫组化分析。G: 正常猪肺组织切片HE染色对照; G’: 感染后猪局部肺组织织切片HE染色; G’’: 感染后猪局部肺组织免疫组化。 /
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