脑内法脊髓灰质炎神经毒力评价

猕猴在进化上与人类高度同源，种属差异小，在组织结构和生理特征上与人类极为相似，这一突出特点奠定了恒河猴动物在药物生产和评价、功能和进化比较基因组学研究、人类重大疾病模型复制和应用、再生医学等研究领域中不可或缺的优势地位。

使用脑立体定位仪将微量注射器针头插入丘 脑，在两侧丘脑分别注入0.5mL脊髓灰质炎疫苗样 品，原倍浓度及 10-1 浓度各10只。 注射后 48h 内 死亡或出现非特异性麻痹症状者剔除不计，中途死 亡及到期处死动物，做中枢神经系统病理组织学 检查。动物在给药 21d 后，进行安乐死并解剖。 完整 取出脑组织及脊髓，10％甲醛溶液充分固定后，进行 取材。 取材时首先寻找脑顶叶区注射点，在注射点前后各取一个切面，以确保取材部位包含针迹。 取 材部位包括： 额叶、顶叶、注射点、颞叶、枕叶、海马、 基底节、丘脑（以上部位左右大脑双侧取材）、中脑、 小脑、脑桥、延髓、颈膨大、腰膨大。0.2

本模型主要表现为脑组织的病理学改变：注射后 ４８ ｈ 内 死亡或出现非特异性麻痹症状者剔除不计，中途死 亡及到期处死动物，做中枢神经系统病理组织学 检查。动物在给药 ２１ ｄ 后，进行安乐死并解剖。将脊髓法中的半切面评分法用于脑内法病理改变的评 价方法，分别对脑组织、脊髓颈膨大和腰膨大的半 切面病变进行评分，并对这三个部位的平均病变分 值进行计算，根据分值并参考具体情况进行病变程 度的判定。评分标准如下： ０ 分，未见 病变；１ 分，轻微病变，仅有炎细胞浸润，未见神经元 损害；２ 分，轻度病变，炎细胞浸润伴有少量的神经 元损害；３ 分，中度病变，炎细胞浸润伴有广泛的神 经元损害；４ 分，重度病变，大量的神经元损害，伴或不伴有炎细胞浸润