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BALB/cA-nu BALB/cA-nu小鼠,胸腺缺失,为第11对染色体隐性遗传,T细胞免疫缺陷,B细胞正常,具有较高的NK细胞活力,无接触敏感性,无移植排斥反应。
制作稳定高表达GFP的细胞,在荧光显微镜下呈强荧光,并且荧光均匀分布于整个细胞内。单克隆GFP细胞在无G418筛选压力下,传代数次后仍能稳定高水平表达GFP(图1)。细胞形态和未转染细胞无明显区别。
图1绿色荧光标记的BGC823细胞系
模型制作采用BALB/cA-nu裸小鼠,鼠龄6周,体重16—20g。BALB/cA-nu裸小鼠在实验室无特定病原体饲养间饲养。收集处于生长对数期的MGC803-eGFP肿瘤细胞,稀释至5×106cells/mL。取200μL细胞悬液进行皮下注射接种。
在接种的7、14、21、28天观察肿瘤的生长情况。在接种的第7天就可以观察到肿瘤荧光,通过肿瘤组织发出的荧光的光子数确定肿瘤的大小,随着观察天数的增加,肿瘤的体积和发光强度增加,且具有很好的相关性。
图2皮下接种BGC-823-GFP肿瘤生长影像分析
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