H5N1气管镜感染猪模型

猪是流感病毒生态学的重要宿主，因为它们容易感染禽流感和人流感病毒，并且经常参与种间传播。猪很容易感染禽流感病毒和人流感病毒，并被建议用作产生人流感病毒大流行株的中间宿主。

猪可以作为流感病毒“混合器”, 其依据是人甲型流感病毒不易传播给禽类, 反之亦然;而两者与猪之间的物种障碍却很低。禽、猪和人流感病毒的某些亚型之间抗原和遗传的相似性以及猪对禽和人流感病毒的易感性构成了猪作为流感病毒中间宿主和“混合器”的基础。

猪作为流感病毒中间宿主和“混合器”的作用还可以从以下几方面得到佐证: (1) 猪比人更易感禽流感病毒, 因此混合过程更可能发生在猪身上。(2) 大多数的禽和人流感病毒倾向于结合到特定的受体类型, 猪呼吸道上皮细胞表面同时存在人流感病毒偏爱的受体唾液酸α-2, 6-半乳糖苷 (SAα-2, 6-Gal) 和禽流感病毒偏爱的受体唾液酸α-2, 3-半乳糖苷 (SAα-2, 3-Gal)。这样猪既可轻易地感染人流感病毒, 又可方便地接受禽流感病毒的感染, 从而成为人、禽和 (或) 猪流感病毒通过基因重排产生新亚型的“混合器”。(3) 发生于猪体内的人与禽流感病毒的基因重组是出现人流感大流行病毒株的重要机制。多次全球流行的流感病毒株都含有禽流感病毒基因, 因此从实际流行情况来看, 猪也是人-禽流感病毒重组的重要中间宿主。

SPF级巴马小型猪，4周龄。实验前进行血清学检查，HI方法检测血清中人和猪流感病毒抗体，抗体阴性为合格猪方可入组实验。

病毒株为A/Vietnam/1194/2004，经血凝抑制（HI）实验，筛选出4周龄以下对当下流行的人流感病毒和猪流感病毒相应血清抗体均为阴性的SPF级巴马小型猪。

实验猪经过轻度麻醉后待肌肉彻底放松，将其放置仰卧位，用喉镜撑开会厌，通过气管插管将H7N9病毒液滴入上呼吸道。感染后观察临床症状，监测存活率及体重变化率。感染后5d处死，收集肺组织，进行肺组织载量检测和病理学检查。

接种107TCID50病毒的实验猪感染后未见明显临床症状，无死亡。

图1 感染后体重变化率

接种107TCID50病毒的实验猪在感染后5d处死取肺组织，通过RT-PCR检测，可以明显观察到肺组织有病毒RNA复制。

图2 组织病毒滴度