实验性牙槽突裂兔模型

摘要：本研究的目的是在不损害动物的健康情况下建立一种适当模拟临床缺陷环境的组织工程骨替代材料的牙槽突裂动物模型。创裂手术的目的是创造一个完整的齿槽裂，宽的骨缺损，上皮衬里(口腔粘膜)覆盖在裂隙缺损上。

方法：对死后新西兰兔的颅骨进行成像调查。一个微型计算机断层扫描影像预试验来证实手术的可行性和缺陷。对16只，8周龄的建立体内齿槽裂手术动物模型进行了测试和评价。

结果：临床检查和影像学分析，在所有兔子模拟牙槽突裂手术后8周发现一个广泛的骨骼缺陷延伸到鼻粘膜。

结论：我们的外科技术成功地创建一个相当大和可预测的骨移植材料试验模型。该模型允许模拟裂区环境，可用于评价各种骨移植材料在骨形成和愈合潜力方面的效果，而不损害动物的健康。

背景：先天性牙槽嵴裂是一种畸形，是由于在妊娠4～12周内未融合原腭引起的。牙槽突裂修复的目的是建立上颌骨牙槽嵴的骨连续性。密封口鼻传播，为口腔修复创造良好的解剖学。应用自体骨、同种异体骨和异种骨移植材料以及各种组织工程骨替代材料进行牙槽突裂植骨。优化现有骨移植材料的质量，寻找新的、更好的骨替代材料是提高临床疗效的关键。各种移植材料的实验测试需要预先建立一个适当的生物学模型来进行实验研究，并评估骨形成和愈合的临床效果。模拟牙槽突裂的动物模型被认为是适当的临床干预试验的实验模型。一些动物模型已被用于检测齿槽裂植骨材料包括小鼠，大鼠，兔，猫，狗，猪，山羊，绵羊和猴。在实验动物中的牙槽突裂的发展是可以实现的，无论是手术或先天所致宫内胚胎发育过程。与大的模型，包括兔子相比，啮齿类动物模型有其固有的局限性。啮齿类动物有较小的长骨，更脆弱的皮层，不在皮质显示骨型重构。兔子没有攻击性，容易观察，在妊娠和成熟方面时间较快。兔的骨组织学与人类骨不太相似。文献报道了兔和人骨密度和断裂韧性的相似性。与灵长类动物和啮齿类动物相比，兔子表现出快速的骨骼代谢和骨转换率，主要是皮质重塑。为了正确地模拟人的体内环境，兔模型是一种适合于牙槽嵴裂实验研究的动物模型。因为兔子是可重复的，精确的，易于内部处理，比较容易麻醉，提供足够大的面积进行测试和可以承受手术创伤大小适当的哺乳动物。

方法：微焦点CT(微CT)成像调查：通过对兔颅骨的显微CT成像，获得了骨骼解剖的影像学分析，以评估牙槽突裂的可行性和裂裂手术的计划。使用横断面切片和三维重建进行图像评价。

先天性牙槽嵴裂手术与微CT成像：对已死亡的家兔头部进行了外科手术。不需要经过动物伦理委员会的批准，因为这一程序是在一个被处死的动物上进行的，而这只动物曾被用于另一个动物试验项目。根据所提出的程序进行裂裂手术。术后微焦点CT(Micro-CT)评估兔颅骨缺损。

体内牙槽突裂形成术：动物、麻醉和饲养 实验手术前30 min 用盐酸甲苯噻嗪5mg/kg,肌肉注射麻醉家兔. 兽医按照已经使用的方法对动物进行镇静、麻醉和护理。研究期间动物单笼饲养，动物按照统一协议饲养观察直到试验结束。

新西兰兔体内牙槽突裂手术(n = 16)上颌牙槽突手术部位的准备：兔仰卧位手术在无菌条件下进行。在左侧中切牙外侧进行2厘米左右的线性粘膜切口。沿着牙弯曲，延伸到左中切牙的远中颊角，然后延伸到中线乳头面部左侧中央切口的牙龈边缘。拨开牙龈和软组织暴露上颌牙槽和中切牙牙周附着。随后，皮瓣骨膜下暴露鼻孔。用弯曲的骨膜剥离器保护和提高鼻粘膜不要刺破鼻粘膜。用一个圆形硬质合金牙钻的旋转器械，在左侧中切牙的外侧弯曲处进行侧截骨，以形成一个显露中切牙根的窗口。用小牙挺将中央切牙轻轻脱位向侧壁，后使用兽医拔牙钳提取。进一步的截骨手术去除上下用咬骨钳骨板暴露鼻粘膜不损伤粘膜。然后将骨蜡应用于缺损的骨壁，并近似口腔粘膜。在内侧和外侧用可吸收缝线缝合。伤口中央部分开着，形成一个口袋，可以俯视骨缺损。最后用氧化纤维素填充缺陷。整个手术过程中鼻粘膜保持完整。动物被允许8周的时间来修复缺损和形成上颌牙槽缺损。第二阶段采用相同的手术准备和严格的手术，暴露牙槽骨缺损进行骨移植。牙槽骨缺损部位作一个近缘切口分离口腔。暴露骨缺损，用牙钻固定骨壁。家兔术后直接喂饲软饲料。

手术后牙槽突裂的锥形束CT：在造模术后8周，用锥形束CT对兔颅骨进行了术后成像。

结果：新西兰白兔颅骨骨调查：新西兰兔上颌前牙的窝藏两配对中切牙和双附件腭侧切牙。中切牙突出，呈半圆形，副腭切牙较小，约占中切牙长度的一半。取出一根中切牙检查颅骨，发现突出的牙齿穿过鼻孔下方的上颌骨，留下一层薄薄的骨，将牙槽窝与鼻粘膜分开。取出的中切牙牙槽窝形成7～8毫米的囊状腔，是牙槽裂研究的理想模型。一旦上下骨板被切除，以产生一个连续的缺陷，模拟常见的先天性齿槽裂患者。

先天性牙槽嵴裂手术与微CT成像：兔颅骨牙槽突裂手术的模拟研究显示创建一个适当大小的缺损的可行性。这种缺陷可以很容易地扩展到鼻粘膜来模拟真实的临床缺陷。很容易封闭软组织和缝合黏膜。缺损的三维显示一个宽度为8毫米的三角形牙槽裂缺损。模拟牙槽裂缺损患者的临床表现。

新西兰兔体内创造手术牙槽突裂：每只兔的手术时间在15到30分钟之间，所有的程序都可以在没有气管插管的氯胺酮麻醉期间进行。在少数情况下需要额外注射氯胺酮。出血是轻微的，这些动物在手术后立即活跃并表现得很好。动物在手术后的第一天就开始进食了。动物在整个研究期间自由采食。所有兔术后8周存活，直至处死。

术后牙槽突裂CT：在8周的愈合后，在一个动物身上进行了计算机断层扫描。缺损部位的三维图显示一个宽度为8毫米的三角形牙槽裂缺损。延伸到与缺陷部位尖鼻并对牙槽窝的深度进行了验证。

结论：一种简单、可预测的牙槽突裂兔模型的临床试验。组织工程骨替代材料可以根据现有的解剖结构建立。中切牙的拔牙术，通过将其延长到鼻粘膜来修改拔牙窝，在腭裂修复期的应用简易骨蜡和氧化纤维素材料避免骨的快速生成和缺损的填充。允许8周的愈合产生一个可预测的大小缺陷，可用于以后的移植过程。

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