兔模型：术后镇痛效果临床评价

摘要：评估兔的疼痛具有挑战性，缺乏该物种有效手术镇痛的研究。寻求术后疼痛的潜在指标，我们进行卵巢子宫切除术和遥测位置作为20只雌性兔温和的手术损伤。实验兔被分配到1到4组(每组5个)：丁丙诺啡(0.02mg/kg SC 每12h一次连续3d);芬太尼(25μg术前贴片24 h);酮洛芬(1mg/kg SC 每24小时一次连续3d)，对照组(不给予治疗)。各种生理和行为变量由双盲的观察员记录，包括饲料和水的消耗，粪便，遥测记录器日常行为。与术前相比，饲料消耗(1至7天)，耗水量(1至4天)，粪便排出量(1至2天)，平均移动距离显著下降。我们的研究结果表明兔术后出现大量厌食和正常活动水平降低。虽然从实验兔经验剂量(通常推荐的止痛药剂量)治疗的结果没有明显优于那些从未经处理的对照组。其他剂量和多种镇痛联合技术 监测镇痛的技术在未来的研究中被证明是有用的。

背景： 从传染病倒骨科手术兔作为动物模型被广泛应用。使用兔约41%被报告为D类，这意味着他们接受了涉及疼痛或痛苦的操作，并接受药物以减轻与操作相关的痛苦或疼痛。然而，疼痛和痛苦可以被有效控制，只有当使用有效的识别方法和镇痛药。尽管在各研究领域广泛使用实验兔，但是临床缺乏评估疼痛的相关方法。兔在疼痛时，通常不显示明显的行为;很难知道他们经历的痛苦和镇痛方法是否有效。评估动物的疼痛的方法包括客观测量的疼痛阈值或对有害刺激的延迟响应和生理变量(例如，血压、心率或呼吸频率)。这些结果的测量往往是用于疼痛生物医学的研究，但可能不适合用于评估的动物临床状态。临床上，目标组合(例如，体重，食物或水的消耗量)和主观(例如，精神状态，活动，处理，外观)评估可以结合起来算"得分"。 这种方法是复合测量疼痛评分系统。许多动物的临床疼痛评分系统已被开发，但已被验证的相对较少，意味着可能对检测到的痛苦不敏感。尝试开发一个兔的一致疼痛评分系统是不成功的。制定一个临床疼痛评分系统，必须首先建立相关组件。为此，我们试图评估术后兔几个变量的变化(遥测植入术)通过评估活动，除了更多的传统变量如食物和水消耗量和体重。初步采集视频数据表示，实验兔显示在传统的笼子里的行为习惯被严重限制。为了鼓励正常的行为如探索和觅食，我们提供兔1.2×1.8米场地每天4小时的运动时间，我们的假设是手术损伤后实验兔的行为会发生适度的变化。基线变量的变化程度，可以作为评估术后痛苦或痛苦的一种手段。如果这些变化是已知的，那么相同的变量可以作为临床评价和未来评估围手术期镇痛疗效的方法和支持。

材料和方法：动物：雌性，新西兰兔，20只，体重3.0-3.5kg。血清学检测：家兔螺旋体、兔脑炎原虫，纤毛相关呼吸杆菌，多杀性巴氏杆菌阴性。培养发现：巴氏杆菌、嗜肺巴氏杆菌、支气管败血波氏杆菌、梭状芽孢杆菌、沙门氏菌阴性。家兔无寄生虫通过粪便检查总检查体内寄生虫。购入后，实验兔被单独安置在标准钢笼(61*76.2*43.2cm)标准条件(18至21°C，30%到70%的湿度，12:12-H：黑暗周期，每小时15到18换气。兔饲喂高质量商品饲料。

手术：卵巢子宫切除术和遥测植入被用作疼痛手术模型。兔手术之前不禁食。手术当天，使用氯胺酮(35mg/kg IM)和甲苯噻嗪(5mg/kg IM)进行实验兔诱导麻醉。兔用3到3.5mm气管插管，异氟烷维持麻醉(1%至5%的氧)。20号针头插入耳缘静脉，滴注生理盐水10ml/kg/h。对实验兔的腹部、腰部和腹股沟区剃毛，用洗必泰和乙醇准备手术区域消毒。在整个过程中坚持无菌技术。通过腹侧正中切口进行卵巢切除术。将供应子宫和卵巢的血管采用止血夹结扎。子宫残端采用3-0缝线进行简单连续缝合。切除卵巢、子宫，体内壁切口用3-0缝线进行简单的连续缝合。体壁关闭后，一个无线电遥测发射器放在皮下的侧翼区，心电探头通过皮下隧道放在胸部II导联位置和动脉压力探头通过皮下隧道放到腹股沟手术部位。布比卡因(3mg 0.5%溶液)分布到腹腔内和皮下，皮肤层用3-0聚二恶烷酮缝线连续缝合。腹股沟区手术准备，皮肤切开一个切口露出股动脉。血压力导管放置到股动脉和用4-0聚对二氧环己酮缝合线固定，将股动脉导管插入部位的远端结扎。布比卡因(2mg)被放置在皮下，将腹股沟切口进行2层缝合。皮下层缝合使用简单的连续缝合法，皮肤层采用聚对二氧环己酮缝合线3-0连续皮内缝合。

术后护理：手术前，实验兔被分配随机分为4组(每组5只)，随机选择丁丙诺啡(0.02mg/kg SC每12小时/次 连续3天);芬太尼25μg/片在手术前24小时放置在肩胛间区;酮洛芬1mg/kg, 每24小时/次 连续3天;对照组(不予处理)。没有证据支持任何镇痛药干预兔的疗效观察。给兔提供热支持(红外热灯和水毯)直到他们从麻醉恢复后能保持胸骨斜卧。手术后完全清醒时，实验兔返回到他们的笼子里，遥测装置被激活记录生理数据(血压、心率和身体温度)。

遥测：一个遥测发射机用来收集心率、动脉血压和温度读数。接收器被安装到实验兔笼侧面。这些数据被用于实时检测生理状态，并出现在随后的报告中。

信号采集：体重和食物的评估耗水和粪便排出评分在驯化后一个四维周期进行每日记录，持续到手术后7天。每天7：30至8：00，进行实验兔称重;用称重法评价耗水量，和食物消耗(对漏斗中的颗粒饲料称重)。实验兔转移到活动区记录行为。数字照片拍摄一个笼盘的粪便排出。粪便排出评分系统建立粗略量化粪便产量。手术前的4天建立食物和水的消耗量和粪便排出的基线值。手术当天动物体重被认为是基线重量，手术后的体重减去遥测设备(49 g)获得术后体重。经过3d的驯化后，在手术前的2天进行建立平均基线活动值。对实验兔的行为录像每小时一次15分钟，连续4小时，采用标准监控摄像机。许多的行为发生很少是有用的，所有行为得分，活动距离和饲养受手术影响最大。因此，需要对这些行为变量进行进一步的统计分析。

结果：手术后最初的5 d发生切口裂开的有3只兔，包括酮洛芬组2只(术后第1天和5天)和芬太尼组1只兔(术后2天)。这3只实验兔从并发症发生的那一天起数据被排除在外。镇痛药组治疗组的任何变量无显著性差异。所有实验兔的基线和随后变量被分析。所有的实验兔都经历了术后体重的减轻，体重显著(P小于0.05)低于基线水平。术后1天至7天饲料消耗量与基线值相比显著下降。第1天的平均变化是88.5%(范围-62%至-100%)和第7天2-7.3%(范围3%至-89%)。术后1至4天耗水量与基线相比明显下降(P<0.05)。术后第1天的平均变化是-92.7%(范围-74%至-100%)。术后7天平均变化-16.6%(范围：23%至-49%)。术后1天和2天粪便排出量评分同基线相比明显下降(P<0.05)。手术前4 d平均粪便输出的评分为2。术后第1天平均粪便输出量为0，第2和3天平均为1。术后第4天粪便排出量恢复到基线水平。在术后第1,2,3和7天移行距离显著降低。术后第1天平均变化为-74.8%(范围-24.8%至-100%)。术后第7天移行距离仍然下降，平均变化-38%(范围，60.9%至-83.4%)。

讨论：体重的下降用食物和水的消耗减少来解释也可以通过影响术后代谢解释。持续下降可能同控制术后疼痛不当有关。其他研究也有类似的记录。饲料消耗量在术后7天一直下降，至第七天才恢复基线水平。粪便的排泄量在术后第3天明显下降。术后整体活动减少和存在具体行为变化。总之，我们的数据表明，食物和水的摄入量，活动和粪便排出在评估镇痛效果方面可能是有用的变量。然而，没有一种镇痛药，当使用临床推荐的剂量，能够显著改善手术后兔的行为变化。还需要进行其他疼痛评估和镇痛效果的实验研究。

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