细胞系基因编辑服务

虽然基因编辑动物模型是生物医学研究的有力工具，但是细胞系也具有许多优势，包括使用便捷、实验成本低、适用于高通量筛选，等。北检院细胞系基因编辑服务包括可行性评估，方案设计，细胞转染，单细胞克隆，基因型鉴定，以及所需的表型验证分析。

应用示例

示例1

ACTB基因编码β-ACTIN蛋白，一种细胞骨架蛋白。打靶载体的同源臂约为1 kb，分别利用CRISPR/Cas9技术和EGE™技术介导打靶载体的同源重组。

LMNB1编码核蛋白Lamin-B1，使用了类似的基因编辑策略。

利用流式细胞术分析重组效率发现，在U2OS细胞系中，CRISPR/Cas9介导的EGFP-ACTB基因敲进效率只有1.91%，而EGE™可以达到15.02%，提高了约8倍。在C6细胞系中，EGE技术将EGFP-LMNB1的敲进效率从0.19%提升至3.6%，提高了约19倍。

示例2

hESC和iPSC的基因编辑

高效的EGE™系统是诱导多能干细胞（iPSCs）和人胚胎干细胞（hESCs）基因组编辑的理想选择。

通过非整合质粒从人成纤维细胞诱导重编程为多种iPSC细胞。图A显示相位对比度图像。如图B所示，该iPSC细胞系表达多能性标记物OCT4，SSEA-4和TRA-1-60，并具有正常的核型（图C）。 可以在免疫缺陷小鼠中形成畸胎瘤（图D）。