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| 标识符 | CSTR:16397.09.0G16000434 |
|---|---|
| 资源中文名称 | RT-SHIV/TC静脉途径感染恒河猴模型 |
| 资源英文名称 | Rhesus Macaques intravenously infected with RT-SHIV/TC |
| 疾病概述 | 艾滋病(Acquired Immunodeficiency Syndrome, AIDS)，是由人免疫缺陷病毒（Human Immunodeficiency Virus, HIV）引起，以全身免疫系统严重损害为特征的传染性疾病，是20世纪危害人类健康和生命最严重的病毒性疾病之一。自美国CDC报道首例艾滋病后，到20世纪80年代中期艾滋病发展成为一个全球性的流行病。截止2014年底，HIV已感染3690万人，2014年新增感染者200万，2014年因艾滋病死亡120万人。艾滋病在1985年传入我国，截至2015年5月31日，全国历年累计报告艾滋病530628例，其中艾滋病病人217457例，死亡167159例。艾滋病早已成为全球关注的公共卫生和社会热点问题，艾滋病的预防与治疗也成为当代生物医学研究的前沿热点之一。 |
| 实验动物背景信息 | 恒河猴又名孟加拉猴、猕猴或广西猴。学名为（Macaca mulatta），英文名rhesus macaque。分类所属为哺乳纲(Mammalia)，灵长目(Primates)，人猴猿亚目(Anthopoidea)，猴科(Cercopithecidae)，猕猴属(Macaca)。月经周期为28(1-4)天，发情期为11-12个月，怀孕期163天，产仔期3-6个月，胎产仔1-2只，出生重250-380g，哺乳期3-7个月。 猕猴属中，恒河猴使用最广。因分子生物学进展，栗色猕猴用于生理、生化、遗传、血型及免疫等方面的研究更多，病理研究也不少，常用于医疗和药物实验等。 在生物学研究方面可用于生理学、心理学、遗传学的各种研究。 在生理学研究方面可用于脑功能、血液循环、呼吸生理、生殖生理、内分泌和老年学等各项实验。 在医学研究方面可用于感染人类所特有的传染病，特别是其他动物不能复制的传染病 药物学研究方面，预防小儿麻痹的糖丸，恒河猴是唯一的试验对象 ，人类避孕药物的研究，用恒河猴作试验是极为理想的，此外，恒河猴还常用于放射病出血和骨髓移植的实验。 （一）传染病学研究 （二）药理学和毒理学研究 （三）生殖生理研究 （四）口腔医学研究 （五）行为学和高级神经活动研究 （六）营养、代谢研究 （七）老年病研究 （八）器官移植和眼科研究 （九）内分泌病和畸胎学研究 （十）肿瘤学和环保研究 20世纪60年代出版的《猕猴文献录》中，涉及论文的多达五百余篇；在12种猕猴中，使用栗色猕猴的几乎占一半；试加分析，解剖文章占半数，生理学和生态学其次，再次是分类、地理分布、胚胎、进化、遗传和生化病理各有二十余篇，最少的是古生物和畜养、管理的文章。 |
| 模型制作方法 | 1、实验用病毒：感染毒株为RT-SHIV/TC中国恒河猴细胞适应株，中国恒河猴PBMCs滴定TCID50滴度为5×103TCID50/mL。 2、感染动物：选用体重4-6kg的SPF恒河猴。实验前体检无异常，必须排除猴免疫缺陷病毒(SIV)、猴逆转录D型病毒(SRV-1，2，5)和猴T淋巴细胞性I型病毒(STLV-1)的感染。猴免疫缺陷病毒（SIV）易感性密切相关的4种基因（Mamu-A*01、Mamu-A*02、Mamu-B*08、Mamu-B*17）筛查结果为阴性。所有感染动物必须在ABSL-3室中进行。 3、感染方法：用200 TCID50的RT-SHIV/TC经后肢静脉感染恒河猴。 4、RT-SHIV/TC静脉感染猴样品采集和指标测定：在感染前和感染后3、7、10、14、17、21、28、35、42、50、66、84及98d采集EDTA抗凝血4mL，分别测定血常规、血浆病毒载量、CD4+/CD8+、CD4+细胞绝对数。 5、RT-SHIV/TC静脉感染猴血浆病毒载量的测定：提取EDTA抗凝血浆中病毒RNA，使用SYBR Green I 实时荧光定量RT-PCR方法测定血浆病毒载量。 6、RT-SHIV/TC静脉感染猴外周血CD4+/CD8+比值及绝对数测定：CD3-PerCP、CD4-FITC、CD8-PE抗体标记EDTA抗凝全血淋巴细胞，流式细胞仪测定CD4+/CD8+比值，并根据血常规结果，计算出CD4+T细胞绝对数。 |
| 模型表型数据 | 1、RT-SHIV/TC静脉感染恒河猴外周血病毒载量结果 G1101V和G1102V分别在感染后10d，14d检测到病毒载量（图1），最高峰值出现在21d和17d，分别为6.9×105copies/mL和2.1×106copies/mL，结果显示RT-SHIV能对中国恒河猴进行感染，而且出现典型的病毒血症。 图1 RT-SHIV/TC静脉感染中国恒河猴外周血病毒载量结果 Fig.1 The viremia (viral RNA copies/ml plasma) in Chinese-original rhesus macaquesinfected intravenously with RT-SHIV/TC 2、RT-SHIV/TC静脉感染恒河猴CD4+/CD8+比值结果 G1101V的CD4+/CD8+比值由0d基本值1.83持续波动上升，上升的最高值为232d的3.19，在感染的后续时间中均未有CD4+/CD8+比值低于0d的初始值。G1102V的CD4+/CD8+比值在0d基本值为2.07，在感染的整个期间CD4+/CD8+比值发生缓慢的下降（图2）。 图2 RT-SHIV/TC静脉感染中国恒河猴外周血CD4+/CD8+T淋巴细胞比值 Fig.2 The changes of CD4+/CD8+ ratio of T lymphocytesin Chinese-original rhesus macaques infected intravenously with RT-SHIV/TC 3、RT-SHIV/TC静脉感染恒河猴CD4+细胞绝对数结果 G1101V的CD4+ T淋巴细胞绝对数在0d基本值1973个/μL左右波动，最低值出现在50d，为1598个/μL。G1102V的CD4+ T淋巴细胞绝对数的0d基本值为1918个/μL，在第50d出现了最低值为929个/μL（图3）。 图3 RT-SHIV/TC静脉感染中国恒河猴外周血CD4+T淋巴细胞绝对数 Fig.3 The CD4+ T cell counts (per l blood) in Chinese-original rhesus macaques infected intravenously with RT-SHIV/T |
| 动物模型的评价与验证 | 通过静脉途径，病毒直接感染血液中的靶细胞，制备静脉途径艾滋病恒河猴感染模型，用于艾滋病研究。 |
| 保存方式 | |
| 合作方式 | 合作研究 |
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