H7N9滴鼻途径感染Lewis大鼠模型

2023-12-21 15:30:42

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摘要：禽流感依据其对禽类的致病能力大小可以分为三个程度：高致病性、低致病性和无致病性。其中高致病性禽流感包括H5和H7 两个亚型。但并非所有的H5 和H7 都是强毒株。人高致病性禽流感是由高致病性禽流感病毒某些亚型的毒株引起的人急性呼吸道传染病。由H5N1亚型禽流感引起的症状较重，病死率高。1997年，香港一名3岁的男童因感染禽流感而死亡，在随后的几个月中，共有18个人感染禽流感病毒，其中6人死亡。之后相继有 H9N2、H7N7亚型禽流感感染人类和 H5N1 亚型再次感染人类的报道,禽流感与人禽流感的关系开始倍
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资源中文名称

H7N9 滴鼻途径感染Lewis大鼠模型

资源英文名称

the H7N9-intranasally infected Lewis rat model

疾病概述

禽流感依据其对禽类的致病能力大小可以分为三个程度：高致病性、低致病性和无致病性。其中高致病性禽流感包括H5和H7 两个亚型。但并非所有的H5 和H7 都是强毒株。人高致病性禽流感是由高致病性禽流感病毒某些亚型的毒株引起的人急性呼吸道传染病。由H5N1亚型禽流感引起的症状较重，病死率高。1997年，香港一名3岁的男童因感染禽流感而死亡，在随后的几个月中，共有18个人感染禽流感病毒，其中6人死亡。之后相继有 H9N2、H7N7亚型禽流感感染人类和 H5N1 亚型再次感染人类的报道,禽流感与人禽流感的关系开始倍受关注。 2013 年3 月31 日，依据《国际卫生条例（2005）》，中国政府报告上海和安徽发现3 例人感染新型甲型H7N9 禽流感病毒（以下简称H7N9）病例。在随后的几个月内，以华东地区为代表的我国多个省市陆续确诊并报道多例H7N9禽流感病毒感染人造成重症肺炎甚至死亡的病例，这是世界首次发现的新型重配H7N9禽流感病毒所致的人感染疫情，引起了全球广泛关注。 H7N9禽流感病毒是由H7 的HA 基因，N9 的NA 基因以及H9N2 病毒的6 个内部基因片段重配而成的新型病毒。对目前已公布了全基因组的若干H7N9禽流感患者分离株的序列分析结果显示，该病毒具有与之前其他亚型甲型流感病毒类似的遗传特征，包括对禽类低致病性，感染哺乳动物的能力增强，对金刚烷胺类抗病毒药物耐药，以及对神经氨酸酶抑制剂（如奥司他韦和扎那米韦）敏感。人感染H7N9 禽流感病毒后，临床表现包括发热、咳嗽、呼吸困难、乏力、肌肉酸痛、咯血及胃肠道症状，初始症状并不包括鼻塞和流涕。97%的患者出现肺炎，超过70%的患者发生急性呼吸窘迫综合症（ARDS），部分患者继而进展为顽固性低氧血症和多器官功能衰竭并导致最终死亡。少数病例为轻症，均为儿童，常常仅有发热表现。实验室检测结果显示，患者外周血白细胞正常或减少，淋巴细胞减少，血小板缺乏，以及肝酶轻度升高。约60%的病例具有各种并发症，如冠心病、糖尿病、高血压和慢性阻塞性肺病。病例以老年人（平均年龄62 岁）和男性（69%）居多。研究显示，活禽市场是人感染H7N9 禽流感病毒的可能来源。活禽暴露是人感染的关键风险因素，导致患者感染的主要暴露方式为直接接触染毒的活禽、被其排泄物污染的环境或物品。然而，目前从不同患者体内分离到的病毒株基因组序列存在一定的差异，其进化源头似乎并不相同，因此目前报道的这些病例极有可能是一些独立的感染事件。流行病学调查也为这一论点提供了部分佐证。目前已确诊的人感染病例多为散发，彼此间没有明显的流行病学关联。尽管如此，目前仍有三起疑似家庭聚集案例的报道。基因进化分析显示，H7N9 禽流感病毒是一种新型重配病毒。虽然各基因片段分别与近期东亚地区流行的禽流感病毒同源性较高，但这种基因组成之前从未在禽、人或其他动物中发现过。其HA 基因可能源于我国长三角地区鸭群中的H7 亚型禽流感病毒，NA基因的来源目前尚无定论，早期研究认为其源于欧亚迁徙的候鸟，最新研究则指出它与2010-2011年间途径香港境内的候鸟分离到的H11N9和H2N9病毒高度同源。尽管如此，目前无异议的一致的结论是，野鸟在H7N9 禽流感病毒传播中可能扮演重要角色，鸭群则在将H7N9相关病毒从野鸟传至家禽的过程中，起到至关重要的中间宿主作用。

实验动物背景信息

Lewis大鼠：来源于Wistar原种，最先由Lewis繁殖，1954年Aptekman和Bogden繁殖到20代，到1958年Silvers繁殖到31代。①毛色：白化(a，h，c)。②免疫：接种豚鼠髓磷脂碱蛋白后，对实验过敏性脑脊髓炎敏感。极易感染诱发自家免疫性心肌炎。对诱发自家免疫性复合性肾小球肾炎敏感(这与主要组织相容性复合物有关)。易感染实验过敏性脑炎和药物诱发的关节炎。③生理学：血清甲状腺素高，血清胰岛素和血清生长激素高。动物的肥胖取决于饮食的高脂肪物的含量。雌鼠乙基吗啡的肝脏代谢率高。④肿瘤：常见淋巴瘤，肾肉瘤，纤维肉瘤 MC-39，ML-1，ML-7，Lewis10瘤和Lewis3肉瘤。⑤饲养繁殖：易驯养，繁殖率高。2年龄大鼠的存活率为26％。

模型制作方法

病毒株为A/Anhui/1/2013 (H7N9)禽流感病毒。感染组大鼠在感染后2、3、5、7天各解剖一只进行尸检，测定肺部H7N9病毒RNA和滴度，并同时进行病理学检测。

模型表型数据

1.大鼠体重变化

感染组大鼠体重均呈持续增长（表1、图1）。

表1大鼠体重变化情况

分组天数	攻毒组
实验前	155.8±15.9
攻毒1天	162.7±19.6
攻毒3天	185.9±20.3
攻毒5天	190.5±29.3
攻毒7天	256.6
攻毒21天	-

2.大鼠尸检情况

在不同时间点对感染组大鼠进行解剖，检测肺部病毒复制情况。感染组大鼠肺组织不能分离出H7N9病毒（表2）。

表2大鼠肺部H7N9病毒分离情况

动物号	尸检天数	RT-PCR	Virus Isolation	血清抗体滴度
攻毒1#	2	-	-	-
攻毒2#	3	-	-	-
攻毒3#	5	-	-	-
攻毒4#	7	-	-	-

动物模型的评价与验证

保存方式

合作方式

仅限合作研究

我们的承诺

　　北检检测技术研究院承诺：我们将根据不同产品类型的特点，并结合不同行业和国家的法规标准，选择适当的检测项目和方法进行分析测试，或根据您的要求进行试验分析。为了不断改进我们的工作，我们致力于提高产品质控分析、使用性能检测能力，并持续加强我们团队的科研技术。同时，我们将积极跟进新的技术和标准，以最大程度地满足您的需求和市场要求。