台盼蓝检测细胞活性

实验介绍

正常的活细胞，胞膜结构完整，能够排斥台盼蓝，使之不能够进入胞内；而丧失活性或细胞膜不完整的细胞，胞膜的通透性增加，可被台盼蓝染成蓝色。通常认为细胞膜完整性丧失，即可认为细胞已经死亡，这与中性红作用相反。因此，借助台盼蓝染色可以非常简便、快速地区分活细胞和死细胞。台盼蓝是组织和细胞培养中最常用的死细胞鉴定染色方法之一。注意凋亡小体也有台盼蓝拒染现象。

台盼蓝染色后，通过显微镜下直接计数或显微镜下拍照后计数，就可以对细胞存活率进行比较精确的定量。 并且操作非常简单。

实验仪器

细胞培养器、显微镜、细胞计数仪、流式细胞仪、PCR仪、酶标仪、多功能板阅读器、细胞培养箱、数据分析软件。.

服务范围

细胞增殖和生长评估：通过测量细胞数量、细胞增殖速率、细胞周期等指标，评估细胞的增殖和生长能力。

细胞存活和死亡分析：使用细胞染色剂(如荧光染料、细胞凋亡标记物等)对细胞进行染色，通过流式细胞仪或显微镜观察和计数存活细胞和凋亡细胞的比例。

细胞代谢活性测定：通过测量细胞内代谢产物(如ATP、NADH、细胞色素C等)的含量或活性，评估细胞的代谢活性和能量状态。

细胞毒性和细胞损伤评估：通过测量细胞膜完整性、细胞内酶活性、细胞膜通透性等指标，评估细胞受到的毒性作用或细胞损伤程度。

细胞迁移和侵袭能力分析：使用Transwell装置、Boyden腔等实验装置，评估细胞的迁移和侵袭能力。

细胞克隆形成实验：评估细胞的克隆形成能力和克隆形成效率。

细胞信号通路研究：通过检测细胞内信号分子的表达水平、磷酸化状态等，研究细胞信号通路的活性和调控机制。

细胞药物筛选和药效评估：通过对细胞对不同药物的反应进行测试，评估药物的抗细胞增殖、细胞毒性或细胞保护效果。

实验步骤

1. 用Hanks液配制0.1%台盼蓝溶液；

2. 用0.5%胰蛋白酶：0.2%EDTA=1：1混合液来消化培养的贴壁细胞；

3. 再加入适量Hanks液制成细胞悬液；

4. 将待染色细胞稀释至所需浓度（方法及浓度范围与细胞计数相同）；

5. 每0.1ml细胞悬液约加新鲜配制的染液一小滴，室温下染3—5min；

6. 染色过的细胞材料，取一滴细胞悬液置玻片上，加盖玻片后放高倍镜下观察；

7. 死亡的细胞着浅蓝色并膨大，无光泽。活细胞不着色并保持正常形态，有光泽；

8. 计数1000个细胞中的活细胞和死细胞数目；

9. 统计未染色细胞。

可按公式计算出细胞活率：细胞活率（%）=未染色的细胞数/观察的细胞总数×100