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a1 Na,K-ATPase转基因大鼠
背景品系DahlSalt-sensitiveHSDRat由Dahl等培育成功的Brookhaven种高血压敏感大鼠(HSR)。
构建wta1 Na,K-ATPase cDNA表达载体(图1)。用显微注射法将线性化的转基因载体注射到DahlSalt-sensitive大鼠的受精卵中,用Wistar大鼠作假孕受体,制备转基因大鼠。转基因大鼠出生后,提取基因组DNA。PCR法鉴定转基因首建鼠及其子代基因型。Southern blot检测转基因大鼠组织中wta1 Na,K-ATPase的表达(图2)。
图1 R-alpha1NK转基因载体构建
图2R-alpha1NK转基因大鼠首建鼠southern blot鉴定
泳道1: 首建鼠Tg(wtα1)37;泳道2: 首建鼠Tg(wtα1)48;泳道3: 首建鼠Tg(wtα1)24.
与Dahl盐敏感高血压大鼠相比,转基因Dahl S大鼠更少出现盐敏感高血压,更少高血压性肾脏疾病,和寿命更长(表1和表2,图3和图4)。
1、转基因Dahl S大鼠更少出现盐敏感高血压
表1 野生大鼠与转基因大鼠的血压比较
2、转基因Dahl S大鼠寿命更长
图3 野生Dahl S大鼠及Tg[wta1] Dahl S大鼠杂合子、纯合子大鼠的寿命比较
3、转基因大鼠更少高血压性肾脏疾病
表2 肾脏病理定量分析
图4 野生大鼠与转基因大鼠肾脏组织切片PAS染色
A WT; B tg; C 正常; D,I级肾小球病变; E,II级肾小球病变; F,III级肾小球病变;G,IV级肾小球病变.
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