ApoE基因突变犬动脉粥样硬化及临床并发症模型

内容概述

本研究通过利用CRISPR/Cas9基因编辑以及体细胞核移植技术，成功获得ApoE基因编辑敲除犬模型。在对ApoE基因编辑敲除犬进行正常饮食饲喂至24月龄时 (相当于人类40岁)，其突发右侧肢体无法站立，即右侧偏瘫现象。

通过进一步对其进行磁共振 (MRI) 以及超声检测分析，显示ApoE基因编辑敲除犬脑部多处出现由于动脉粥样硬化导致的明显缺血性梗塞，颈内动脉出现明显斑块以及血管狭窄现象。

通过进一步剖检，结果同样发现其脑部、心脏等多处主要动脉均出现不同程度的迂曲钙化现象，导致犬只脑部出现明显大面积梗塞，心肌纤维化、心肌扩张甚至下肢坏疽等临床相似表型。

另外，病理切片结果显示ApoE基因编辑敲除犬的脑部基底动脉、心脏冠状动脉以及颈部颈内动脉均呈现出由于动脉粥样硬化以及斑块破裂导致的血管巨噬细胞CD68阳性，胶原纤维暴露以及管腔不同程度狭窄闭塞现象。

研究人员还通过进行蛋白质组学分析以全面了解 ApoE 调控的分子途径。上调蛋白的功能富集分析显示了血浆和肝脏中六个富集过程，包括血液微粒、补体和凝血级联、细胞外空间和细胞外外泌体，在血浆和肝脏这两个样本之间，许多其他生物过程显示出不同的富集模式。这些差异表达的蛋白质是与中风相关蛋白和全基因组关联研究 (GWAS) 阳性中风基因产物有所重叠。肝脏蛋白质组学分析及其它结果，证实了 ApoE 及其相关通路在中风病因学中的关键作用。