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细胞划痕实验是一种简单易行的检测细胞运动的方法,实验成本低,可以用来检测贴壁生长肿瘤细胞的侵袭转移能力。
显微镜、细胞培养皿、细胞刮痕器、洗涤器、细胞培养培养基、缓冲液、细胞培养孔板、培养箱、离心机、电子显微镜。
材料: 6 孔板(其他的也可以,但感觉6孔比较好,大小适中)、marker笔直尺、20微升枪头(灭菌)、无血清培养基、PBS
步骤:所有能灭菌的器械都要灭菌,直尺和marker笔在操作前紫外照射30min(超净台内)
1.先用marker笔在6孔板背后,用直尺比着,均匀得划横线,大约每隔0.5~25px一道,横穿过孔。每孔至少穿过5条线。
2.在空中加入约5X105个细胞,具体数量因细胞不同而不同,掌握为过夜能铺满。
3.第二天用枪头比着直尺,尽量垂至于背后的横线划痕,枪头要垂直,不能倾斜。
4.用PBS洗细胞3次,去处划下的细胞,加入无血清培养基。
5.放入37度5%co2培养箱,培养。按0,6,12,24小时取样,拍照。
一般做划痕实验,都是在无血清或者底血清状态下培养的,否则细胞增殖就不能忽略。
按照6孔板背后画线的垂直方向划痕,可以形成若干交叉点,作为固定的检测点,这就解决了前后观察时位置不固定的问题。
北检检测技术研究院承诺:我们将根据不同产品类型的特点,并结合不同行业和国家的法规标准,选择适当的检测项目和方法进行分析测试,或根据您的要求进行试验分析。为了不断改进我们的工作,我们致力于提高产品质控分析、使用性能检测能力,并持续加强我们团队的科研技术。同时,我们将积极跟进新的技术和标准,以最大程度地满足您的需求和市场要求。