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豚鼠作为流感的实验动物有其独有的优势,豚鼠是实验动物,遗传背景相对清楚; 豚鼠能感染人源和禽源A型流感病毒如H5N1,H1N1,H3N2,模拟哺乳动物感染流感病毒。由于豚鼠的成本较低,占有空间小,相关免疫和生化试剂易获得,因此豚鼠适合流感病毒易感性和抗病毒治疗等机制的研究,豚鼠是模拟流感病毒传播的理想动物模型。
病毒株为A/California/07/2009(H1N1),豚鼠经过轻度麻醉后滴鼻感染106TCID50病毒。每日观察记录豚鼠的活动状态及临床表现,存活情况,0、3、5、8、14 d 称量体重。分别感染后第0、3、5 和8 d采集豚鼠鼻腔灌洗液,无菌采集濒死豚鼠的心、肝、脾、肺、肾、小肠、气管和脑组织进行病毒滴度培养和核酸定量检测。
豚鼠感染后未见明显临床症状,未导致豚鼠死亡。
分别在感染后第0、3、5 和8 d采集豚鼠鼻腔灌洗液,处死濒死的豚鼠进行病毒滴度培养和病毒核酸定量检测,豚鼠鼻腔灌洗液能够在第3d和第5d分离到病毒,而组织脏器中未分离到病毒;感染后豚鼠的鼻腔灌洗液和各组织脏器进行病毒核酸定量RT-PCR扩增,鼻腔灌洗液能够检测到病毒RNA,而其他组织未检测到,结果如图1所示。
图1豚鼠感染后鼻腔灌洗液的病毒定量检测结果
感染的豚鼠除肺脏以外,其他组织均无病变。肺组织病理结果如下:感染后部分豚鼠肺组织为重度肺炎,部分为弥漫性间质性肺炎。肺病理切片可见肺静脉及肺泡壁毛细血管明显扩张充血,部分肺静脉壁及周围组织明显水肿,局部支气管及肺泡上皮细胞坏死、脱落,肺泡腔内可见大量渗出和漏出的红细胞、水肿液、炎细胞及坏死脱落的上皮细胞碎屑,图2所示。
图2 豚鼠感染H1N1病毒后的肺组织切片HE染色。A: 正常对照; B: 豚鼠感染病毒后,弥漫性间质性肺炎,病灶广泛融合,血管内炎细胞附壁,血管周围炎细胞渗出,支气管上皮细胞坏死,坏死组织填满支气管管腔。
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