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心脏组织特异性过表达KCNQ1V180LQT间期延长综合症转基因小鼠模型
扩增并经测序比对正确的KCNQ1V180L突变片段插入α-MHC启动子下游构建心脏特异表达KCNQ1V180L表达载体。用显微注射法将线性化的转基因载体注射到C57BL/6J小鼠的受精卵中，用ICR小鼠作假孕受体，制备转基因小鼠。PCR法鉴定小鼠基因型，Western Blot分析KCNQ1V180L突变蛋白的表达情况（图1）。实验中涉及动物的操作程序已经得到中国医学科学院医学实验动物研究所实验动物使用与管理委员会的批准（ILAS-GC-2012-001）。
图1. KCNQlV180L转基因小鼠的建立
(A) 将靶基因KCNQlV180L插入心脏特异表达的α-MHC启动子下游，构建KCNQlV180L转基因表达载体；(B)PCR鉴定KCNQlV180L转基因小鼠基因型，M: DNA分子量标记；1：阳性对照；2：阴性对照；3：空白对照；6，8：阳性转基因小鼠；4，5，7：阴性转基因小鼠；(C) Western Blot分析KCNQl蛋白在转基因小鼠心脏组织中的表达。
图2. KCNQlV180L转基因小鼠生存率分析
注：从出生后至8月龄时，阴性对照小鼠（n=37）无死亡发生，经Spss16.0软件Kaplan-Meier curves分析，KCNQlV180L转基因小鼠死亡率显著性增加（n=29, P < 0.01）。
表1. 1、3、5和7月龄KCNQlV180L转基因小鼠超声分析
注：*P <0.05, **P <0.01, ***P <0.001.
图3. KCNQlV180L转基因小鼠M型超声与心电表型分析
(A)7月龄阴性对照及KCNQlV180L转基因小鼠心脏左室纵向M型超声分析截图；(B) 7月龄阴性对照及KCNQlV180L小鼠经II导联，BIOPAC MP150系统分析心电信号截图。
表2.KCNQlV180L转基因小鼠心电参数变化
注：*P <0.05, **P <0.01.
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2023-12-21 15:26:41
