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Long Evans
利用CRISPR/Cas9技术将THY1.1-BRAINBOW2.1敲入到大鼠ROSA26位点。
在神经科学和发育生物学中,随机多色标记是一种常用的技术。这种技术是构建出含多色荧光蛋白(XFP)的重组载体,并利用它来标记器官或生物体。通过载体上的随机重组,细胞呈现出一种独特的颜色,并且后代都保留这种颜色。哈佛大学的Jeff W. Lichtman研究小组用它来标记小鼠小脑中的神经元,将其命名为Brainbow。Brainbow 1.0版使用红色荧光蛋白(RFP)、黄色荧光蛋白(YFP)和青色荧光蛋白(CFP)。Brainbow 1.1版则加入了橙色荧光蛋白(OFP)。Brainbow利用Cre/lox系统来标记神经元。编码荧光蛋白的基因与单个启动子串联在一起,但只有紧挨着启动子的基因能够表达。在Brainbow 1.0版和1.1版中,紧挨着启动子的分别是RFP和OFP,因此细胞在默认情况下发出红色或橙色荧光,直到重组发生。Cre介导的重组允许下游的其他基因表达,让大脑神经元如彩虹般绚烂。
用来进行目的基因的荧光观察。
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