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PDGF启动子下游插入CYP2E1的cDNA构建脑特异过表达载体,显微注射获得转基因大鼠(见图1)。
图1 PDGF-CYP2E1转基因载体设计策略
获得首建鼠后,7日内剪尾,提取基因组DNA,PCR鉴定基因型如图2。首建鼠与野生大鼠杂交,得到子代大鼠,牺牲分离脑组织提取蛋白进行western blot鉴定,如图3结果显示:CYP2E1在脑的海马和皮层表达均高于野生对照大鼠。
图2 转基因首建鼠的基因型鉴定
图3 westernblot检测CYP2E1蛋白在脑的表达
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