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C57BL/6J
将含有剪接受体位点的增强flp盒连接到下游的PGK-neo盒上，插入内源性基因座。据报道，在携带报告基因的转基因小鼠中，有效的frt特异性重组反应了Gt(ROSA)26Sor在植入前的组成性表达，通过将FLPe盒插入ROSA26敲入载体构建了一个敲入结构(R26Fki)。该结构包括一个由小鼠磷酸甘油酸激酶启动子驱动的新霉素抗性基因。该构建体被电孔到129S4/ s4jaesor来源的AK7胚胎干细胞(ES)中，从而扰乱Gt(ROSA)26Sor位点。利用正确定位的ES细胞生成嵌合体。
该小鼠是含有一个插入Gt（ROSA）26Sor位点的增强型黄色荧光蛋白基因（EYFP）。EYFP的表达被上游的loxP侧翼终止序列阻断。该纯合子的小鼠是可存活的、可育、大小正常，没有任何明显的生理或行为异常。Gt(ROSA)26Saor启动子驱动的酿酒酵母FLP1重组酶基因FLPe变体广泛表达。FLPe重组酶突变体在37C和40C温度下的重组活性分别是野生型FLP的4倍和10倍，热稳定性增强。Gt(ROSA)26Sor启动子从植入前开始驱动表达，广泛的靶基因重组可以在大多数组织类型中实现，包括正在发育的生殖系细胞。
当与含有frt侧翼序列的小鼠杂交时，flp介导的重组将导致后代中frt侧翼序列的缺失。该FLP缺失株可能有助于产生frt-FLP条件突变，并可作为表达flp1的原代细胞系的来源。
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2023-12-21 15:16:42
