条件性HbxipFloxp基因除大鼠模型

2023-12-21 15:32:37

摘要：Hbxip基因（Lamtor5）首次在人肝癌细胞系HepG2中发现，编码一种与乙型肝炎病毒X蛋白(HBx) C端特异性结合的蛋白。该蛋白的功能是负向调节HBx的活性，从而改变病毒的复制生命周期。HBXIP蛋白与多种致癌信号相关：HBXIP通过NF-kB信号通路促进细胞增殖；通过氨基酸激活mTORC1信号通路，促进癌细胞增殖和迁移；通过pAKT/MDM2途径促进人乳腺癌生长。多项研究表明，HBXIP与多种恶性肿瘤的发生发展密切相关，包括乳腺癌、肝癌、肺癌等，可能作为癌蛋白参与多种肿瘤细胞的增殖、凋亡和迁移。
注：因业务调整，暂不接受个人委托测试。

项目咨询

400-062-0567

标识符

CSTR:16397.09.0C01000192

资源中文名称

条件性Hbxip-Floxp基因除大鼠模型

资源英文名称

Hbxip-Floxp conditional knockout rat model

疾病概述

Hbxip基因（Lamtor5）首次在人肝癌细胞系HepG2中发现，编码一种与乙型肝炎病毒X蛋白(HBx) C端特异性结合的蛋白。该蛋白的功能是负向调节HBx的活性，从而改变病毒的复制生命周期。HBXIP蛋白与多种致癌信号相关：HBXIP通过NF-kB信号通路促进细胞增殖；通过氨基酸激活mTORC1信号通路，促进癌细胞增殖和迁移；通过pAKT/MDM2途径促进人乳腺癌生长。多项研究表明，HBXIP与多种恶性肿瘤的发生发展密切相关，包括乳腺癌、肝癌、肺癌等，可能作为癌蛋白参与多种肿瘤细胞的增殖、凋亡和迁移。此外，HBXIP在调节糖代谢中也具有重要作用，参与了对胰岛素基因的转录调控。

实验动物背景信息

F344大鼠

模型制作方法

基因敲除构建设计

模型表型数据

条件性Hbxip-Floxp采用PCR方式进行基因敲除的鉴定。

引物设计	引物名称	引物库	引物序列（5’-3’）	PCR 产物大小
跑胶检测loxp 插入情况	F1	R-CKO-G3-LOXP1-F	TGCATTGTTTGTGGCTTTGTG	KI 275 WT 241
跑胶检测loxp 插入情况	R1	R-CKO-G3-LOXP1-R	ATTCTTCATTCTAATTTTGGGAGC	KI 275 WT 241
跑胶检测loxp 插入情况	F2	R-CKO-G3-LOXP2-F	CTGCTACTAGCCTCCCTTTGG	KI 230 WT 196
跑胶检测loxp 插入情况	R2	R-CKO-G3-LOXP2-R	TCTAAAGCCCTCTTCCAGACC	KI 230 WT 196
跑胶检测送大带测序	F	R-CKO-G3-F	GGAGGTCTTACAAGAAGACGCG	KI1 745 WT 1677
跑胶检测送大带测序	R	R-CKO-G3-R	CCAAGAGGCTCCCTCTGTTC	KI1 745 WT 1677

测序结果：黑色箭头代表野生型序列，红色箭头代表插入的序列，L 端和R 端测序的峰形分析，都可确认在1#大鼠floxp 序列（ATAACTTCGTATAGCATACATTATACGAAGTTAT）精确插入指定位置。具体见图3。根据测序结果分析 Lamtor5-loxp条件性敲除大鼠构建成功。

L 端flxop 插入分析（测序引物：R1）

R 端flxop 插入分析（测序引物：F2）

图3. F/R 引物扩增的PCR 产物测序结果

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