非酒精性脂肪肝病小鼠高脂饮食诱导模型

2023-12-21 15:23:46

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摘要：非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)是代谢综合征在肝脏的表现形式，与肥胖、胰岛素抵抗(IR) 、空腹高血糖症、血脂异常、脂肪因子变异等机体代谢异常明显相关，是目前慢性肝病最常见的病因。NAFLD是以过量的脂质在肝细胞内堆积为特征的连续疾病谱，可由单纯的肝脂肪性变性发展为非酒精性脂肪性肝炎(NASH)，严重时可发展为肝纤维化和肝硬化，NASH一旦合并肝纤维化或肝硬化则可进一步增加肝细胞癌(HCC)的发生风险。

到目前为止，NAFLD的确切发病机制尚不清楚，也缺乏特异性的治疗措施，因此针对发病机制
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标识符	CSTR:16397.09.0F01001019
资源中文名称	非酒精性脂肪肝病小鼠高脂饮食诱导模型
资源英文名称	HFD-induced Nonalcoholic fatty liver disease (NAFLD) in mice
疾病概述	非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)是代谢综合征在肝脏的表现形式，与肥胖、胰岛素抵抗(IR) 、空腹高血糖症、血脂异常、脂肪因子变异等机体代谢异常明显相关，是目前慢性肝病最常见的病因。NAFLD是以过量的脂质在肝细胞内堆积为特征的连续疾病谱，可由单纯的肝脂肪性变性发展为非酒精性脂肪性肝炎(NASH)，严重时可发展为肝纤维化和肝硬化，NASH一旦合并肝纤维化或肝硬化则可进一步增加肝细胞癌(HCC)的发生风险。到目前为止，NAFLD的确切发病机制尚不清楚，也缺乏特异性的治疗措施，因此针对发病机制和潜在治疗药物的研究是目前该领域的热点。动物模型可通过模拟不同的病因以及NAFLD每个阶段的组织病理学和病理生理学改变，为了解NAFLD发病机制和进展提供关键性的指导。
实验动物背景信息	6周龄C57BL/6J雄性小鼠， 16-18 g。
模型制作方法	1 实验材料 1.1 实验动物选择40 只健康雄性C57BL /6 小鼠，体质量16-18 g，均购于北京唯尚立拓科技有限公司，实验动物许可证号：SCXK(京) 2016-0009，饲养于中国医学科学院实验动物研究所动物房内，5只/盒，温度( 22±2) ℃，湿度50% ～ 60%，12 h 循环照明，小鼠自由摄取食、水。 1.2仪器与试剂 1）全自动生化分析仪用于检测三酰甘油( triglyceride, TG) 、总胆固醇( total cholesterol, TC) 、低密度脂蛋白(low density lipoprotein, LDL)、高密度脂蛋白(highdensity lipoprotein, HDL) 等生化指标。2）石蜡包埋机( LEICA)。3)高脂饲料主要营养物质含量：60% 脂肪、20%碳水化合物和20%蛋白质 2 方法 2.1 动物模型制备采用高脂饮食诱导NAFLD模型，造模用饲料货号为MD12033( 60% 脂肪、20%碳水化合物和20%蛋白质) ，购自江苏美迪森生物有限公司，持续造模12周，并在第6 周、9周和12 周分别进行糖耐量和胰岛素耐量测定，检测模型小鼠是否发生糖耐量受损，从而判断模型进展。 2.2 标本采集及处理在实验结束后，称取小鼠体质量，用1%戊巴比妥钠腹腔注射麻醉，仰卧位置于动物实验台上，固定四肢，脱毛后暴漏胸腹部，采用腹主动脉采血方法。室温静置30 min后，3,000 rpm，4°C离心15 min，分离血清，测定血脂水平。解剖小鼠腹腔，肉眼观察肝脏大体形态，在肝右叶同一位置切取1 块0.5 cm × 0.5 cm ×0.3 cm肝组织，滤纸吸干后称质量，其中一块进行及时冰冻切片，用于油红O染色。其余肝组织分装于1.5 mL 离心管中，-80℃低温保存。
模型表型数据	1 肝脏大体形态变化 2 肝脏脂肪水平指标检测 3肝脏脂滴染色 4 血清脂质水平检测
动物模型的评价与验证
保存方式
合作方式

我们的承诺

　　北检检测技术研究院承诺：我们将根据不同产品类型的特点，并结合不同行业和国家的法规标准，选择适当的检测项目和方法进行分析测试，或根据您的要求进行试验分析。为了不断改进我们的工作，我们致力于提高产品质控分析、使用性能检测能力，并持续加强我们团队的科研技术。同时，我们将积极跟进新的技术和标准，以最大程度地满足您的需求和市场要求。