高盐诱导盐敏感大鼠高血压模型

1.Dahl/盐敏感大鼠(Dahl/SS),科学名称：SS/JrHsdMcwiCrlVr，近交系（Inbred Rat）

品系来源 ：1962年，Brookhaven国家实验室的LK Dahl从SD封闭群中选育出对NaCl引发的高血压敏感/抗性的大鼠种群，1986年，俄亥俄医学院的John P Rapp利用该核心群得到Dahl 盐敏感/抗性大鼠，Harlan实验室从俄亥俄医学院引进， Theodore Kurtz(UCSF, CA)从SS/Jr种群中一组同品系的对照Dahl/SS大鼠近交得到 Dahl /盐敏感大鼠，1991年以后，威斯康星医学院一直维持该种群 2001年引入Charles River ，2011年维通利华从Charles River引入第17代核心群。

2.盐敏感大对照鼠SS-13BN Rat，科学名称：SS-Chr13BN/McwiCrlVr，同类系（Consomic Rat）。

诱导方法：6周龄Dahl/盐敏感大鼠及盐敏感对照大鼠SS-13BN，分别给予高盐饮食（8%的NaCl）和低盐饮食（0.12%的NaCl），连续4周，每周测量血压。

1.高盐饮食对血压的影响

高盐（8%的NaCl）喂养2周后，Dahl/盐敏感大鼠血压开始升高，4周后，盐敏感大鼠高盐喂养组血压显著高于对照组，而盐敏感对照大鼠组血压差异不显著。

图1. 高盐和低盐喂养后，盐敏感性血压大鼠和对照大鼠血压的变化

（注：* P<0.05，Dss+High salt vs. control+High salt, ttest n=5；#P<0.05 vs. Dss+High salt vs. Dss+Low salt, ttest, n=5）

2.肾脏组织病理结果

Dahl/盐敏感大鼠高盐（8%的NaCl）喂养4周后，肾小管萎缩，敏感对照大鼠肾组织未见明显损伤。

图2.大鼠肾脏组织HE染色（×400倍）

3.炎症细胞浸润

Dahl/盐敏感大鼠高盐（8%的NaCl）喂养4周后，CT3标记的T淋巴细胞及CD68标记的巨噬细胞在肾组织中表达显著多于对照组，肾脏发生炎症反应。

图3.大鼠肾脏组织CD3(T淋巴细胞)和CD68(巨噬细胞) 免疫组化（×400倍）

4.血小板相关指标的测定

4.1血小板活化测定：流式细胞术检测发现Dahl/盐敏感大鼠高盐（8%的NaCl）喂养4周后，P-选择素表达显著高于其它组，血小板发生活化；

图4. 盐敏感大鼠和对照大鼠高盐喂养和低盐喂养后血小板活化（注：* P<0.05, Dss-H vs. others, one-way ANOVA, Scheffe`s test，n=5）

4.2血小板内钙离子浓度的测定：血小板内钙离子浓度Dahl/盐敏感大鼠高盐（8%的NaCl）喂养组显著高于其它组。

图5. 盐敏感大鼠和对照大鼠高盐喂养和低盐喂养后血小板内Ca2+的浓度（注：* P<0.05, Dss-H vs. others, one-way ANOVA, Scheffe`s test，n=5）

4.3血小板细胞膜离子通道NHE-1表达量的变化：Dahl/盐敏感大鼠高盐（8%的NaCl）喂养组血小板细胞膜的那氢交换体1的表达量显著高于其它组。

图6. 盐敏感大鼠和对照大鼠高盐喂养和低盐喂养后血小板细胞膜NHE-1蛋白的表达（注：* P<0.05, Dss-H vs. others, one-way ANOVA, Scheffe`s test，n=5）

5.肾脏炎症因子IL-6的表达

免疫印迹结果显示，Dahl/盐敏感大鼠高盐（8%的NaCl）喂养组肾脏IL-6的表达显著高于其它组。

图7. 盐敏感大鼠和对照大鼠高盐喂养和低盐喂养后大鼠肾脏内IL-6的表达

（注：* P<0.05, Dss-H vs. others, one-way ANOVA, Scheffe`s test，n=5）