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小鼠由于繁殖周期短、遗传背景均一、个体差异小等优点,被广泛用作流感病毒研究的动物模型,不仅有完备的检测试剂,还有相应的基因敲除、转基因小鼠可用于机制方面的研究。小鼠多表达禽源流感病毒α2,3SA受体,人源流感病毒α2,6SA受体较少,曾局限的认为小鼠较适合用于α2,3SA受体结合的流感病毒研究,后有研究发现受体特异性并不影响某些病毒对小鼠的致病力和复制能力。
制作流感病毒感染动物模型多应用SPF级雌性BALB/c小鼠,4-6周龄。
病毒株为A/California/07/2009(H1N1),BALB/c小鼠经过轻度麻醉后滴鼻感染病毒。小鼠感染后观察14天,监测存活率及体重变化率。感染后分时间段安乐小鼠,每个时间点收集相同数量小鼠肺、脾、脑、心等组织,进行病毒滴度测定和组织病理学检查。
感染小鼠早期表现出食欲减退、消瘦;后期出现被毛逆立、弓背、反应迟钝、眼半闭等。第3天开始出现消瘦、竖毛、精神萎靡等症状,感染后第4天开始死亡,第8天100%死亡。感染后小鼠体征表现如图1所示,存活情况如图2所示,体重变化情况如图3所示。
图1 小鼠模型感染甲型H1N1病毒后临床症状变化
图2 小鼠模型感染甲型H1N1病毒后存活率
图3 小鼠模型感染甲型H1N1病毒后体重变化情况
小鼠感染甲型H1N1病毒后仅能在肺组织中检测到病毒的复制,病毒于感染后3-5天达到峰值(104TCID50),随后逐渐下降(图4)。
图4小鼠模型感染甲型H1N1病毒后肺组织病毒滴度测定情况
甲型H1N1病毒造成的肺脏病变较弥漫,肺泡上皮细胞病变明显。病毒在较低浓度时(103~102TCID50),造成的肺组织损伤范围相对局限,但也可合并细菌感染在肺组织局部引起严重病变,如图5所示。
图5 小鼠模型感染甲型H1N1病毒后肺组织病毒滴度测定情况. A: 正常对照; B: 感染后小鼠局部肺组织实变; C: 感染小鼠肺间质水肿,肺泡上皮细胞增生,炎性细胞浸润,血管扩张充血及出血。
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