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BALB/cA-nu小鼠,胸腺缺失,为第11对染色体隐性遗传,T细胞免疫缺陷,B细胞正常,具有较高的NK细胞活力,无接触敏感性,无移植排斥反应。
转染获得稳定表达GFP的细胞株,选择其中高表达的克隆株扩大培养。经过多次传代表达水平稳定,标记细胞的形态、生长方式、生长速度及致瘤能力等与未转染细胞无明显差异。
图1.绿色荧光标记的HCT-8细胞系
模型制作采用BALB/cA-nu裸小鼠,鼠龄5周,体重15—18 g,BALB/cA-nu裸小鼠在实验室无特定病原体饲养间饲养。收集处于生长对数期的细胞,稀释至5×106cells/mL。取200μL细胞悬液进行皮下接种。
分别在接种的7、14、21、28和35 d观察肿瘤的生长情况。在接种的第7天就可以观察到肿瘤发光,通过肿瘤组织发出的荧光的光子数可以确定肿瘤的大小,随着观察天数的增加,肿瘤的体积和发光强度增加,且具有很好的相关性(图2)。以肿瘤细胞发射的光子数对小鼠荷瘤时间作图,得到绿色荧光蛋白标记肿瘤细胞在裸鼠体内的生长曲线(图3)。
图2皮下接种HCT-8-GFP肿瘤生长影像
图3皮下接种绿色荧光HCT-8小鼠肿瘤生长曲线
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