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Balb/c
本项目为了建立HCV感染的小鼠模型，克隆了人的OCLN编码基因，将其插入pUBC载体的泛素基因启动子下游。
Occludin（OCLN）是拥有4个跨膜结构域的蛋白，存在于极化的上皮细胞的紧密连接组分中。最近的研究表明：OCLN是HCV病毒的细胞内受体。在可以支持HCV复制的肝细胞系（如Huh7）、或者缺乏其它受体蛋白的的细胞系中（诸如HepG2和293T），均发现低水平OCLN的表达。过表达OCLN并不会提高细胞系对HCV的敏感性，但是，对OCLN基因的沉默却会抑制HCV感染Hep3B和Huh-7.5细胞系。这表明OCLN在HCV自然感染肝细胞的过程中是必不可少的成分。在表达有其它受体蛋白、但是对HCV侵染抵抗的细胞系中过表达OCLN，可以导致该细胞系对HCV感染的敏感性提高。
通过构建转基因小鼠，筛选到了1个表达OCLN的mRNA的转基因品系：Founder23。同时，RT-PCR检测表明：OCLN蛋白广泛表达于转基因小鼠的各个脏器和组织中，包括血液、心、肝、脾、肺、肾、肠、骨骼肌和神经组织。经Western blotting检测，发现在F23的肝脏内，OCLN成功表达。
RT-PCR（上图）和Western Blotting（下图） 检测人OCLN转基因小鼠体内目的蛋白的表达。
该模型可以用来研究丙肝病毒的传播和治疗。
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2023-12-21 15:15:36
