人肠道病毒71型感染人PSGL1转基因小鼠模型

2023-12-21 15:26:55

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摘要：手足口病是肠道病毒引起的传染性、出疹性疾病，该病多发生于5岁以下的婴幼儿，可引起发热和手、足、口腔等部位的皮疹、溃疡，个别手足口病患者可引起心肌炎、肺水肿、无菌性脑膜脑炎等并发症，而神经源性肺水肿、肺出血和心力衰竭被认为是导致死亡的主要原因。

　　引发手足口病的肠道病毒有20多种，包括柯萨奇病毒A组和B组、人肠道病毒71型（EV71）以及疱疹病毒、腺病毒等，其中以柯萨奇病毒A16型(CA16)和肠道病毒71型（EV71）最为常见。而绝大多数重症手足口病病例，均由EV71或CA16病毒感染所致。
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标识符	CSTR:16397.09.0C01000309
资源中文名称	人肠道病毒71型感染人PSGL-1转基因小鼠模型
资源英文名称
疾病概述	手足口病是肠道病毒引起的传染性、出疹性疾病，该病多发生于5岁以下的婴幼儿，可引起发热和手、足、口腔等部位的皮疹、溃疡，个别手足口病患者可引起心肌炎、肺水肿、无菌性脑膜脑炎等并发症，而神经源性肺水肿、肺出血和心力衰竭被认为是导致死亡的主要原因。　　引发手足口病的肠道病毒有20多种，包括柯萨奇病毒A组和B组、人肠道病毒71型（EV71）以及疱疹病毒、腺病毒等，其中以柯萨奇病毒A16型(CA16)和肠道病毒71型（EV71）最为常见。而绝大多数重症手足口病病例，均由EV71或CA16病毒感染所致。 EV71属于微小RNA病毒科，肠道病毒属，主要通过粪口传播，病毒最初定植于鼻咽部或胃肠道粘膜，侵入淋巴组织并在其中繁殖，进而引起第一次病毒血症。若机体免疫力差，病毒可扩散至全身组织器官，大量繁殖后再次入血，引起第二次病毒血症，最终侵犯靶器官，如脑、脑膜、脊髓、心肌和横纹肌以及皮肤黏膜组织，引起重症病变，尸检时主要病变为神经元坏死等。日本学者指出PSGL-1蛋白是人的EV71病毒受体，在小鼠细胞内表达人PSGL-1蛋白可以提高小鼠细胞对EV71的敏感性。建立骨骼肌和神经组织表达人PSGL-1蛋白的转基因小鼠，可提高小鼠对病毒的敏感性，有望提高敏感小鼠的年龄，从而建立成年的EV71感染模型。
实验动物背景信息	背景品系：C57BL/6J,表达人PSGL-1蛋白的转基因小鼠，动物品系名称为：C57BL/6J-TgN(CMV-Homo-PSGL-1)-ZLFILAS。
模型制作方法	转基因小鼠构建　　以人PSGL-1的mRNA为模板，经反转录获得人PSGL-1的cDNA，将其插入pCDNA3.1(+)载体的启动子下游，构建转基因载体。载体经测序验证正确后，将其线性化并经显微注射到C57BL/6J的受精卵中，用129做假孕受体，制备转基因小鼠。转基因小鼠提取鼠尾DNA进行基因鉴定（h-PSGL-F: 5’-CTACCAAAAGAGGTCTGTTC-3’；h-PSGL-R: 5’-ATGAGATGCAGACCATCTCG-3’），采用RT-PCR法检测组织内基因表达情况（h-PSGL-CF: 5’-GTGGTGCTGGCGGTCCG-3’；h-PSGL-CR: 5’-CAGGCCCCCATTGGCTGTG-3’），并用兔抗人PSGL-1的多克隆抗体检测组织内蛋白表达情况。 1、病毒制备　　使用的临床分离株包括：1.FY0805a，2008年分离自安徽省阜阳市，GenBank存储号为HQ882182；2.JK2009,2009年分离自重庆市，GenBank存储号为HQ694982；使用的小鼠适应株为MP10，为FY0805a在小鼠体内连续传代10次后的小鼠适应株，GenBank存储号为HQ712020。EV71在人横纹肌瘤细胞（RD）中培养、繁殖，采用三次冻融法释放病毒，超速离心法富集病毒，病毒储存于超低温冰箱中，病毒储存液浓度为1×109TCID50/ml。 2、实验动物　　可使用SPF级别的10日龄乳鼠，品系为C57BL/6J-TgN(CMV-Homo-PSGL-1) -ZLFILAS，母鼠自然哺乳，在动物生物安全二级实验室内独立饲养。 3、病毒感染　　根据预实验确定感染剂量，10日龄乳鼠经轻度麻醉后，经腹腔注射1×108TCID50 的EV71JK2009,攻毒体积为100微升/只；小鼠适应株EV71 MP10的感染剂量为5×106TCID50，注射体积为100微升/只，空白对照组注射等量RD细胞上清。我们的承诺　　北检检测技术研究院承诺：我们将根据不同产品类型的特点，并结合不同行业和国家的法规标准，选择适当的检测项目和方法进行分析测试，或根据您的要求进行试验分析。为了不断改进我们的工作，我们致力于提高产品质控分析、使用性能检测能力，并持续加强我们团队的科研技术。同时，我们将积极跟进新的技术和标准，以最大程度地满足您的需求和市场要求。相关文章中析实验室上一篇：痴呆症模型小鼠下一篇：双转基因痴呆症模型小鼠服务领域动物模型生物学检测动物实验联系方式热线电话: 400-062-0567 投诉举报：010-82491398 邮箱地址：010@yjsyi.com 京ICP备15067471号-9 联系我们济南分部山东省济南市历城区唐冶绿地汇中心36号楼北京分所北京市丰台区航丰路8号院1号楼1层121 聊城分所山东省聊城市高唐最新发布动物冷冻保种服务动物净化服务实验外包服务小鼠基因编辑大鼠基因编辑服务细胞系基因编辑服务基于ESC/HR的基因编辑体外ADME 体内PK 代谢产物鉴定福建分所热门项目高尿酸血症鹌鹑肠道菌群结构分析实验外包服务鹌鹑动脉粥样硬化模型关节炎模型痴呆症模型小鼠过敏性哮喘诱导模型高蛋白高钙饮食合并限制饮水建立鹌鹑痛风模型细胞转染实验小鼠急性结核感染模型（含耐药结核模型）流式分选友情链接：

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