手足口病柯萨奇病毒A10型灌胃感染小鼠模型

2023-12-21 15:23:08

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摘要：手足口病是由多种肠道病毒引发的病毒性传染病，主要传播途径是粪口传播，多发于婴幼儿以及5岁以下儿童。手足口病一般为自限性的，轻症表现为发热和手、足、口腔等部位出现疱疹或斑丘疹，多数患儿一周左右自愈；但少数患儿可引起心肌炎、肺水肿、无菌性脑膜脑炎等重症的神经系统并发症。个别重症患儿病情发展快，可导致死亡。引发手足口病的肠道病毒有20多种（型），主要由肠道病毒（enterovirus）、柯萨奇病毒（coxsakievirus）和埃可病毒（echovirus）组成。自2008年在新加坡的暴发流行，柯萨奇病毒A10
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标识符	CSTR:16397.09.0G01001232
资源中文名称	手足口病柯萨奇病毒A10型灌胃感染小鼠模型
资源英文名称	Coxsackievirus A10 intragastrically infected mice model
疾病概述	手足口病是由多种肠道病毒引发的病毒性传染病，主要传播途径是粪口传播，多发于婴幼儿以及5岁以下儿童。手足口病一般为自限性的，轻症表现为发热和手、足、口腔等部位出现疱疹或斑丘疹，多数患儿一周左右自愈；但少数患儿可引起心肌炎、肺水肿、无菌性脑膜脑炎等重症的神经系统并发症。个别重症患儿病情发展快，可导致死亡。引发手足口病的肠道病毒有20多种（型），主要由肠道病毒（enterovirus）、柯萨奇病毒（coxsakievirus）和埃可病毒（echovirus）组成。自2008年在新加坡的暴发流行，柯萨奇病毒A10型（Coxsackievirus A10，CA10）成为手足口病主要致病血清型之一，由其感染引起的手足口病爆发事件在法国、芬兰、印度等国家和地区不断被报道。在我国，2013年以前主要流行的手足口病病原以EV71和CA16为主，CA6和CA10次之；而在2013年以后，CA10引起的手足口病比例逐渐上升，成为国内手足口病感染的优势病原体之一。CA10共分为A～G的7个基因型，可根据各地流行株的序列信息进行核苷酸和氨基酸的同源性对比，从而分析CA10的流行情况。在我国，CA10近年来在多地区流行的病毒株保持着较高的同源性，与其他国家的分离株之间的同源性距离较远，具有地域分布特点以及一定的时间分布特点。CA10传染性强、隐性感染比例大、传播途径复杂、传播速度快，在短时间内可造成较大范围的流行，疫情控制难度大。
实验动物背景信息	ICR小鼠毛色白化。适应性强，体格健壮，繁殖力强，生长速度快，实验重复性较好，雌鼠自发性畸胎瘤和管状腺瘤发病率为0%~1%，用氨基甲酸乙酯诱发时，11~16天胚胎期畸胎瘤和管状腺瘤发病率为5.9%，离乳个体管状腺瘤和囊瘤发生率为30%，孕鼠为3%。是国际通用的封闭群小鼠。外周血项和骨髓细胞，具有较好的稳定性，是良好的血液学实验用动物。10日龄以内的ICR乳鼠对手足口病原较为敏感，由于CA10病毒具有嗜肌性，乳鼠感染后常表现出竖毛、单肢瘫痪、双肢瘫痪、甚至死亡的病症，是进行是手足口病原研究的理想动物。
模型制作方法	1.病毒准备：CA10病毒(GenBank: MF688814.1)，由医院咽拭子分离得到，在人横纹肌瘤细胞（RD）中培养、扩增，并采用反复冻融法释放病毒，离心富集病毒。（1）细胞病毒培养操作： RD细胞经常规传代培养接种到T75细胞培养瓶，培养至融合度约80%；感染前弃去原培养基，细胞用含2%双抗的PBS 洗2遍，吸出PBS后加入无血清DMEM培养基。接种适量的CA10病毒后，置于37℃ 5% CO2培养箱孵育1~2h；之后弃去无血清培养基，加入完全培养基继续培养。接种病毒后2~3d细胞病变CPE达到+++～++++，将T75细胞瓶置封口袋中，-80℃超低温冰箱冻化3次。然后将培养液转移至50mL离心管中，4℃ 2000rpm离心20min，沉淀细胞碎片。吸取病毒上清，分装后冻存，并测定病毒滴度TICD50。（2）组织病毒培养操作：将CA10病毒以肌肉点注方式感染10日龄ICR乳鼠，三天后取肌肉组织置于适量PBS中研磨均匀，3000rpm离心30min，上清即为病毒液，分装后置于-80℃冰箱保存。 2.实验动物：采用SPF级7日龄ICR小鼠乳鼠，母鼠自然哺乳，在ABSL-2实验室独立饲养。CA10动物模型建立实验通过IACUC审核，符合动物实验要求。病毒感染：根据预实验确定的感染剂量，即107TCID50CA10病毒，将病毒经灌胃途径感染小鼠，感染剂量为100μl。对照组灌胃同等量的PBS。我们的承诺　　北检检测技术研究院承诺：我们将根据不同产品类型的特点，并结合不同行业和国家的法规标准，选择适当的检测项目和方法进行分析测试，或根据您的要求进行试验分析。为了不断改进我们的工作，我们致力于提高产品质控分析、使用性能检测能力，并持续加强我们团队的科研技术。同时，我们将积极跟进新的技术和标准，以最大程度地满足您的需求和市场要求。相关文章中析实验室上一篇： Gorab腹部皮肤条件敲除小鼠下一篇：CD4+T细胞GPR68基因敲除黑色素瘤小鼠皮下移植瘤模型服务领域动物模型生物学检测动物实验联系方式热线电话: 400-062-0567 投诉举报：010-82491398 邮箱地址：010@yjsyi.com 京ICP备15067471号-9 联系我们济南分部山东省济南市历城区唐冶绿地汇中心36号楼北京分所北京市丰台区航丰路8号院1号楼1层121 聊城分所山东省聊城市高唐最新发布花粉活力发芽率检测保质期（加速）试验种子发芽率检测驱虫检测驱蚊试验驱蚊实验空气中细菌检测动物冷冻保种服务动物净化服务实验外包服务福建分所热门项目高尿酸血症鹌鹑肠道菌群结构分析过敏性哮喘诱导模型高蛋白高钙饮食合并限制饮水建立鹌鹑痛风模型鹌鹑动脉粥样硬化模型实验外包服务痴呆症模型小鼠关节炎模型 STZ诱导糖尿病ICR小鼠模型人大细胞肺癌H460红色荧光标记肿瘤模型大鼠脊髓损伤模型友情链接：

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