PDGFhαSynuclein转基因帕金森病小鼠模型

构建带有神经特异性启动子的质粒PDGF-h-α-synuclein，用显微注射法将线性化转基因质粒注射到C57BL/6J小鼠受精卵中，以C57BL/6J小鼠作假孕受体。

SYN-WT转基因阳性小鼠脑部病理表型

酪氨酸羟化酶免疫组化：

为了观察转入的外源性α-synuclein基因对小鼠脑组织中酪氨酸羟化酶的影响，用免疫组化检测10月龄α-synuclein转基因阳性小鼠及同窝阴性对照小鼠酪氨酸羟化酶的表达，结果如图4。10月龄人α-synuclein 转基因小鼠在黑质纹状体区均出现多巴胺能神经元胞浆内阳性着色，与阴性对照鼠相比并未表现出明显差异。

图4.酪氨酸羟化酶免疫组化

免疫组化检测酪氨酸羟化酶在脑组织中黑质纹状体区的表达情况。图中左侧为放大100倍，右侧为放大400倍图像。A，B为10月龄野生型小鼠脑组织的免疫组化；G，H为10月龄SYN-WT转基因小鼠脑组织的免疫组化。

脑苏木素伊红染色：

取10月龄人α-synuclein WT转基因小鼠及同窝阴性对照小鼠脑组织石蜡切片，HE染色后比较，与阴性对照鼠相比，转基因小鼠神经元及神经胶质细胞大小及形态未见明显差异，结果如图5。

图5. 脑组织HE染色 （x100）

图中左侧为海马区，右侧为黑质纹状体区。A，B为10月龄野生型小鼠脑组织HE染色，G，H为10月龄SYN-WT转基因小鼠脑组织HE染色 （x100）。

SYN-WT转基因阳性小鼠行为学表现

Rotating rod 实验

取2月，4月和7月龄SYN-WT转基因小鼠和同窝阴性对照小鼠分别进行Rotating rod实验，发现2月龄开始出现行为改变但尚不明显，4月龄时较阴性对照小鼠表现出协同能力差，运动能力下降，在转棒仪上可停留的时间明显短于对照组小鼠。7月龄时运动能力下降更加明显，与阴性对照鼠相比下降了45.5%。结果如图6。

图6. 转基因小鼠Rotating rod 实验结果

分别取2月，4月和7月龄SYN-WT及同窝阴性对照鼠，每组12只，测试其可在转棒仪上停留时间。*P<0.05。