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SPF级的MSG2基因敲除小鼠,C57BL/6j小鼠。
设计并构建MSG2的sgRNA,进行体外细胞水平sgRNA活性测试,设计并构建Donor载体,对受精卵进行显微注射和移植,待F0代小鼠出生后鉴定小鼠基因型,选择阳性小鼠继续繁育。
6周龄雄性的MSG1基因敲除小鼠和野生型小鼠饲喂45%脂肪含量的高脂饲料,同时设置正常饲料组作对照。
分别饲喂MSG2基因敲除小鼠和野生型对照小鼠高脂饲料(HFD) 和常规对照饲料(SD),喂食14周。期间每周测量小鼠体重并做好记录,给予高脂饲料12周后测量葡萄糖耐量(GTT)和胰岛素耐量(ITT)、代谢笼、食物摄入量等生理指标。喂食14周高脂饲料后对脂肪组织进行H.E.染色,统计脂肪细胞大小及脂滴大小并检测代谢相关基因。骨骼肌脂质含量检测及骨骼肌代谢能力评估。
MSG2基因敲除小鼠,机体能量代谢率减弱,当给予高脂饮食时,MSG2敲除小鼠明显比野生型对照小鼠肥胖。
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