动物模型

小鼠模型

Fezf2敲除小鼠 HDAC1敲除小鼠 Azin1A1099TG1100C条件性点突变小鼠 WOT2DE小鼠 POHDC小鼠 NOD/ShiLtJ小鼠 Sele和Sell双基因敲除小鼠模型全身性表达IL19V2转基因小鼠全身性表达IL9转基因小鼠免疫系统人源化小鼠模型
鹌鹑模型

鹌鹑高尿酸血脂代谢症动物模型建立高蛋白高钙饮食合并限制饮水建立鹌鹑痛风模型高尿酸血症鹌鹑肠道菌群结构分析鹌鹑动脉粥样硬化模型高脂高嘌呤饮食联合氧嗪酸钾诱导鹌鹑糖脂代谢紊乱模型建立
大鼠模型

Abcb1基因人源化大鼠 CYP3AA1A18基因敲除大鼠 TMPRSS2敲入大鼠 CAMKV条件性敲除大鼠 Irs1基因敲除大鼠 CRHCre工具大鼠 GdaCre工具大鼠 AIF1Cre工具大鼠大鼠嗅球切除模型 CCK基因敲除大鼠
疾病模型

肠道病毒71人清道夫受体B2（hSCARB2）转基因动物模型人结直肠癌细胞HCT116绿色荧光标记肿瘤模型 A/Vietnam/1194/2004（H5N1）滴鼻途径感染布氏田鼠模型 A/California/07/2009（H1N1）滴鼻感染虎斑猫模型人低分化前胃癌细胞BGC823荧光素酶标记肿瘤模型布氏田鼠 H5N1禽流感病毒气溶胶吸入感染雪貂模型 2009年甲型H1N1流感布氏田鼠模型 D5R基因敲出诱导盐敏感性高血压模型心肌梗死模型
犬鼠模型

静脉注射大肠杆菌制备高动力型感染性休克犬模型犬动物模型：锥形非血管化膀胱移植输尿管重建犬自体同源颅骨成形术模型的建立右心室起搏致心力衰竭犬模型 A/California/07/2009（H1N1）滴鼻感染比格犬模型富血小板血浆协同改善Beagle犬手术诱导的骨关节炎模型建立 ApoE基因突变犬动脉粥样硬化及临床并发症模型犬扩张型心肌病变模型建立
羊类模型

西藏羊动物模型构建蒙古羊动物模型构建鲁中山地绵羊动物模型构建湖羊模型建立兰州大尾羊模型构建小尾寒羊动物模型构建鄂尔多斯细毛羊动物模型构建陕北细毛羊动物模型构建
猪类模型

A/California/07/2009(H1N1)经气管途径感染猪模型甲型H1N1流感病毒气管插管感染猪模型 A/Vietnam/1194/2004（H5N1）经气管途径感染猪模型免疫抑制剂诱导小耳畸形猪模型双侧外耳缺失伴发外耳道闭锁的猪动物模型 H5N1气管镜感染猪模型
鱼类模型

急性白血病斑马鱼模型 ddx18基因敲除导致的斑马鱼白血病模型耳功能损伤斑马鱼模型丙型肝炎病毒亚复制子斑马鱼模型心肌损伤斑马鱼模型帕金森疾病（PD）斑马鱼模型非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）斑马鱼模型
猴类模型

SHIVKB9静脉途径感染恒河猴模型 SHIVKU1静脉途径感染恒河猴模型 SHIVchn19p4静脉途径感染恒河猴模型帕金森疾病恒河猴基因修饰模型气管镜感染MERSCoV绒猴模型 A/SZ/406H/2006(H5N1)经气管途径感染恒河猴模型 SHIVSF162P3静脉途径感染恒河猴模型 SHIVSF162P3阴道途径感染恒河猴模型 SHIV1157ipd3N4阴道途径感染恒河猴模型新型冠状病毒再感染恒河猴模型
兔类模型

兔模型：术后镇痛效果临床评价鼠疫菌的豚鼠和新西兰兔模型建立新西兰兔骨缺损动物模型实验性牙槽突裂兔模型心肌铁过载兔模型的制作 SARSCoV滴鼻途径感染新西兰兔模型过敏性紫癜兔模型心搏骤停兔模型构建

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Foxi3敲除小鼠先天性小儿畸形动物模型

2023-12-21 15:24:29

原创版权

摘要：小耳畸形的病因目前还不完全明确，环境和遗传因素是目前小耳畸形病因研究的重点。先天性小耳畸形在基因突变致病性研究方面还没有阐明小耳畸形胚胎发育的机制。小耳畸形主要涉及胚胎发育期间第一和第二鳃弓的异常，主要表型涉及外耳发育异常。外耳的耳廓是由第一和第二鳃弓的逐渐融合形成的，在发育过程中第一和第二鳃弓之间是相互作用，两弓之间的凹槽加深，形成外耳道，从胚胎的起源来分析，外耳的发育至少在一定程度上是由第一和第二鳃弓通过后脑的部分区域来介导的，后脑是鳃弓的神经嵴细胞的来源，在后脑的第四段基因突变可以导致外耳的发育缺陷
注：因业务调整，暂不接受个人委托测试。

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资源中文名称

Foxi3敲除小鼠---先天性小儿畸形动物模型

资源英文名称

疾病概述

小耳畸形的病因目前还不完全明确，环境和遗传因素是目前小耳畸形病因研究的重点。先天性小耳畸形在基因突变致病性研究方面还没有阐明小耳畸形胚胎发育的机制。小耳畸形主要涉及胚胎发育期间第一和第二鳃弓的异常，主要表型涉及外耳发育异常。外耳的耳廓是由第一和第二鳃弓的逐渐融合形成的，在发育过程中第一和第二鳃弓之间是相互作用，两弓之间的凹槽加深，形成外耳道，从胚胎的起源来分析，外耳的发育至少在一定程度上是由第一和第二鳃弓通过后脑的部分区域来介导的，后脑是鳃弓的神经嵴细胞的来源，在后脑的第四段基因突变可以导致外耳的发育缺陷。

实验动物背景信息

利用Cre/loxP重组系统的原理，进行基因敲除（knockout，KO），制备FOXI3敲除小鼠。小鼠的背景品系是C57BL/6。

模型制作方法

(一)设计方案：

Foxi3forkhead box I3 [Mus musculus(house mouse) ]

Gene ID: 232077

Location: 6; 6 C1

Exon count: 2

（二）根据基因信息选择靶点，合成sgRNA

targeting site 1:

tcccaggtataagagacg cgg

M-FOXI3-sgRNA-UP1 5’TAGGtcccaggtataagagacg

M-FOXI3-sgRNA-DOWN1 5’aaacCGTCTCTTATACCTGGGA

targeting site 2:

atcgctcctcagacttga tgg

M-FOXI3-sgRNA-UP2 5’TAGGatcgctcctcagacttga

M-FOXI3-sgRNA-DOWN2 5’aaacTCAAGTCTGAGGAGCGAT

(三)显微注射

1，超数排卵：15只3-4周龄C57雌鼠注射激素进行超排。

2，受精卵注射：取约150枚受精卵进行注射。

3，雄鼠结扎：制作30只8周龄输精管结扎的ICR雄鼠。

4，受体鼠制备：8-10周龄ICR与结扎的ICR雄鼠交配后选取见栓的雌鼠。

5，胚胎移植：将注射后的受精卵移植到受体鼠输卵管壶腹部（移植一次， 150枚卵，5只受体鼠）。

(四)显微注射基因型鉴定

1，剪尾编号：出生7-10天的乳鼠，剪取脚趾和尾尖进行编号及取材。

2，基因组DNA提取：使用全式金（Transgen）公司的基因组DNA提取试剂盒（EE101-12）提取基因组DNA

3，PCR检测：根据序列信息设计检测引物（上海英潍捷基）

M-FOXI3-ko-s 5’CAAATAAGTAGTCAATCCACTCAAACG 61.4℃

M-FOXI3-ko-a 5’TCCCACCCTTAACTCCAATGAC 62.3℃

M-FOXI3-wT-s 5’GGGCTGATTGATCTCTGAGTTC 60.2℃

M-FOXI3-wT-A 5’AGGTGCTGAGGAAAGTGTTGAG 60.8℃

M-FOXI3-ko-s&A:TM=61℃KO 603bp

M-FOXI3-wt-s&A:TM=60℃WT 496bp

PCR反应体系及扩增程序（TaKaRa RR042A）

4，反应体系：

10×LA PCR BufferⅡ(Mg2+ Plus)	2.0 μl
dNTP Mixture(2.5 μM)	1.6 μl
引物-S（50 μM ）	0.2 μl
引物-A（50 μM ）	0.2 μl
模板DNA	2.0 μl
LA Taq	0.2 μl
补加ddH2O至总体积	20.0 μl

5，扩增程序：

95℃

15 min；

95℃, 30 s

TM-2℃, 30 s

72℃, 1 min 30循环；

72℃

min；

6×loading buffer 终止反应。

用1%的琼脂糖凝胶进行电泳。

我们的承诺

　　北检检测技术研究院承诺：我们将根据不同产品类型的特点，并结合不同行业和国家的法规标准，选择适当的检测项目和方法进行分析测试，或根据您的要求进行试验分析。为了不断改进我们的工作，我们致力于提高产品质控分析、使用性能检测能力，并持续加强我们团队的科研技术。同时，我们将积极跟进新的技术和标准，以最大程度地满足您的需求和市场要求。

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