动物模型

小鼠模型

CD4+T细胞GPR68基因敲除黑色素瘤小鼠皮下移植瘤模型小剂量链脲霉素结合高脂饲料喂养诱导的糖耐量异常小鼠模型 stat3敲除小鼠人脑胶质瘤异种移植小鼠模型系统表达FLP转基因小鼠 Pax1点突变小鼠外耳畸形模型系统性过表达GRK4γA142V转基因小鼠心脏特异性表达FAM55A转基因小鼠 PEF2EC小鼠 MHCII型细胞特异表达GFP转基因小鼠模型
鹌鹑模型

高脂高嘌呤饮食联合氧嗪酸钾诱导鹌鹑糖脂代谢紊乱模型建立高蛋白高钙饮食合并限制饮水建立鹌鹑痛风模型鹌鹑高尿酸血脂代谢症动物模型建立高尿酸血症鹌鹑肠道菌群结构分析鹌鹑动脉粥样硬化模型
大鼠模型

神经特异表达CUX2cre工具大鼠乳腺组织特异表达GNG2cre工具大鼠人DNMT1转基因大鼠 PUBCCre工具大鼠（Wistar)MIR451基因敲除大鼠 TMPRSS2敲入大鼠 HBV全基因组转基因大鼠 PnocCre工具大鼠 Brainbow大鼠（LongEvans背景）APPswe/PS1dE9/TAU转基因AD大鼠
疾病模型

人食管癌细胞EC9706绿色荧光标记肿瘤模型轻症EV71动物模型 H9N2滴鼻感染雪貂模型 2009年甲型H1N1流感布氏田鼠模型人胃腺癌MGC803绿色荧光标记肿瘤模型脑内法脊髓灰质炎神经毒力评价东莨菪碱模型雌激素诱导性狼疮皮肤病模型 DOCA诱导急性盐敏感性高血压模型结核树鼩模型
犬鼠模型

A/California/07/2009（H1N1）滴鼻感染比格犬模型 ApoE基因突变犬动脉粥样硬化及临床并发症模型犬动物模型：锥形非血管化膀胱移植输尿管重建犬扩张型心肌病变模型建立犬自体同源颅骨成形术模型的建立富血小板血浆协同改善Beagle犬手术诱导的骨关节炎模型建立右心室起搏致心力衰竭犬模型静脉注射大肠杆菌制备高动力型感染性休克犬模型
羊类模型

鄂尔多斯细毛羊动物模型构建蒙古羊动物模型构建兰州大尾羊模型构建陕北细毛羊动物模型构建湖羊模型建立西藏羊动物模型构建小尾寒羊动物模型构建鲁中山地绵羊动物模型构建
猪类模型

A/California/07/2009(H1N1)经气管途径感染猪模型免疫抑制剂诱导小耳畸形猪模型甲型H1N1流感病毒气管插管感染猪模型 H5N1气管镜感染猪模型 A/Vietnam/1194/2004（H5N1）经气管途径感染猪模型双侧外耳缺失伴发外耳道闭锁的猪动物模型
鱼类模型

急性白血病斑马鱼模型 ddx18基因敲除导致的斑马鱼白血病模型丙型肝炎病毒亚复制子斑马鱼模型耳功能损伤斑马鱼模型心肌损伤斑马鱼模型帕金森疾病（PD）斑马鱼模型非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）斑马鱼模型
猴类模型

SHIVKU1静脉途径感染恒河猴模型气管镜感染MERSCoV绒猴模型 SHIV1157ipd3N4静脉途径感染恒河猴模型帕金森疾病恒河猴基因修饰模型 SIVmac239静脉途径感染恒河猴模型结核猴模型（含耐药结核猴模型）SHIV1157ipd3N4阴道途径感染恒河猴模型猕猴局部脑缺血模型肌苷致猕猴急性高尿酸血症 SHIVSF162P3阴道途径感染恒河猴模型
兔类模型

心搏骤停兔模型构建兔模型：术后镇痛效果临床评价鼠疫菌的豚鼠和新西兰兔模型建立 SARSCoV滴鼻途径感染新西兰兔模型心肌铁过载兔模型的制作新西兰兔骨缺损动物模型实验性牙槽突裂兔模型过敏性紫癜兔模型

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Foxi3敲除小鼠先天性小儿畸形动物模型

2023-12-21 15:24:29

原创版权

摘要：小耳畸形的病因目前还不完全明确，环境和遗传因素是目前小耳畸形病因研究的重点。先天性小耳畸形在基因突变致病性研究方面还没有阐明小耳畸形胚胎发育的机制。小耳畸形主要涉及胚胎发育期间第一和第二鳃弓的异常，主要表型涉及外耳发育异常。外耳的耳廓是由第一和第二鳃弓的逐渐融合形成的，在发育过程中第一和第二鳃弓之间是相互作用，两弓之间的凹槽加深，形成外耳道，从胚胎的起源来分析，外耳的发育至少在一定程度上是由第一和第二鳃弓通过后脑的部分区域来介导的，后脑是鳃弓的神经嵴细胞的来源，在后脑的第四段基因突变可以导致外耳的发育缺陷
注：因业务调整，暂不接受个人委托测试。

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资源中文名称

Foxi3敲除小鼠---先天性小儿畸形动物模型

资源英文名称

疾病概述

小耳畸形的病因目前还不完全明确，环境和遗传因素是目前小耳畸形病因研究的重点。先天性小耳畸形在基因突变致病性研究方面还没有阐明小耳畸形胚胎发育的机制。小耳畸形主要涉及胚胎发育期间第一和第二鳃弓的异常，主要表型涉及外耳发育异常。外耳的耳廓是由第一和第二鳃弓的逐渐融合形成的，在发育过程中第一和第二鳃弓之间是相互作用，两弓之间的凹槽加深，形成外耳道，从胚胎的起源来分析，外耳的发育至少在一定程度上是由第一和第二鳃弓通过后脑的部分区域来介导的，后脑是鳃弓的神经嵴细胞的来源，在后脑的第四段基因突变可以导致外耳的发育缺陷。

实验动物背景信息

利用Cre/loxP重组系统的原理，进行基因敲除（knockout，KO），制备FOXI3敲除小鼠。小鼠的背景品系是C57BL/6。

模型制作方法

(一)设计方案：

Foxi3forkhead box I3 [Mus musculus(house mouse) ]

Gene ID: 232077

Location: 6; 6 C1

Exon count: 2

（二）根据基因信息选择靶点，合成sgRNA

targeting site 1:

tcccaggtataagagacg cgg

M-FOXI3-sgRNA-UP1 5’TAGGtcccaggtataagagacg

M-FOXI3-sgRNA-DOWN1 5’aaacCGTCTCTTATACCTGGGA

targeting site 2:

atcgctcctcagacttga tgg

M-FOXI3-sgRNA-UP2 5’TAGGatcgctcctcagacttga

M-FOXI3-sgRNA-DOWN2 5’aaacTCAAGTCTGAGGAGCGAT

(三)显微注射

1，超数排卵：15只3-4周龄C57雌鼠注射激素进行超排。

2，受精卵注射：取约150枚受精卵进行注射。

3，雄鼠结扎：制作30只8周龄输精管结扎的ICR雄鼠。

4，受体鼠制备：8-10周龄ICR与结扎的ICR雄鼠交配后选取见栓的雌鼠。

5，胚胎移植：将注射后的受精卵移植到受体鼠输卵管壶腹部（移植一次， 150枚卵，5只受体鼠）。

(四)显微注射基因型鉴定

1，剪尾编号：出生7-10天的乳鼠，剪取脚趾和尾尖进行编号及取材。

2，基因组DNA提取：使用全式金（Transgen）公司的基因组DNA提取试剂盒（EE101-12）提取基因组DNA

3，PCR检测：根据序列信息设计检测引物（上海英潍捷基）

M-FOXI3-ko-s 5’CAAATAAGTAGTCAATCCACTCAAACG 61.4℃

M-FOXI3-ko-a 5’TCCCACCCTTAACTCCAATGAC 62.3℃

M-FOXI3-wT-s 5’GGGCTGATTGATCTCTGAGTTC 60.2℃

M-FOXI3-wT-A 5’AGGTGCTGAGGAAAGTGTTGAG 60.8℃

M-FOXI3-ko-s&A:TM=61℃KO 603bp

M-FOXI3-wt-s&A:TM=60℃WT 496bp

PCR反应体系及扩增程序（TaKaRa RR042A）

4，反应体系：

10×LA PCR BufferⅡ(Mg2+ Plus)	2.0 μl
dNTP Mixture(2.5 μM)	1.6 μl
引物-S（50 μM ）	0.2 μl
引物-A（50 μM ）	0.2 μl
模板DNA	2.0 μl
LA Taq	0.2 μl
补加ddH2O至总体积	20.0 μl

5，扩增程序：

95℃

15 min；

95℃, 30 s

TM-2℃, 30 s

72℃, 1 min 30循环；

72℃

min；

6×loading buffer 终止反应。

用1%的琼脂糖凝胶进行电泳。

我们的承诺

　　北检检测技术研究院承诺：我们将根据不同产品类型的特点，并结合不同行业和国家的法规标准，选择适当的检测项目和方法进行分析测试，或根据您的要求进行试验分析。为了不断改进我们的工作，我们致力于提高产品质控分析、使用性能检测能力，并持续加强我们团队的科研技术。同时，我们将积极跟进新的技术和标准，以最大程度地满足您的需求和市场要求。

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